β-烟酰胺单核苷酸通过抑制NF-κB通路缓解高毒力肺炎克雷伯菌血流感染及肝损伤的机制研究

本研究揭示β-烟酰胺单核苷酸（NMN）通过抑制NF-κB信号通路激活，显著改善高毒力肺炎克雷伯菌（hvKP）血流感染（BSI）小鼠生存率，并联合抗生素治疗减轻肝脏炎症反应和脓肿形成。该发现为hvKP相关肝损伤的免疫调节治疗提供了新策略。

　　

研究背景

高毒力肺炎克雷伯菌（hvKP）引发的血流感染（BSI）和肝脓肿是临床常见危重症，但其肝脓肿形成机制尚不明确。既往研究表明，NAD⁺前体β-烟酰胺单核苷酸（NMN）在脓毒症中具有抗炎作用，但对hvKP感染的保护机制未见报道。

NMN提升hvKP感染生存率的机制

实验显示，hvKP感染24小时后小鼠肝脏NAD⁺水平显著下降，同时NAD⁺补救合成途径关键酶Nampt表达上调。通过腹腔注射NMN（185 mg/kg）预处理，小鼠生存率提高50%，而NAMPT抑制剂FK866则加剧死亡率，该效应可被NMN逆转。值得注意的是，NMN虽未显著降低血液、肝脏和脾脏的菌落数（CFU），但能降低肝损伤标志物ALT和AST水平，并抑制炎症因子Il6、Il1b、Tnf和Cxcl2的转录。

巨噬细胞依赖的保护作用

通过氯膦酸盐脂质体（Clo-Lip）清除巨噬细胞后，NMN的生存保护作用完全消失。体外实验进一步证实，NMN（500 μM）处理虽未增强骨髓来源巨噬细胞（BMDM）对hvKP的吞噬能力，但能逆转FK866对吞噬功能的抑制。转录组分析显示，NMN预处理显著下调BMDM中Myd88、nfkb1/2及炎症因子基因表达，KEGG通路富集提示NF-κB和TNF信号通路被抑制。Western blot和免疫荧光证实，NMN减少p65核转位及IκBα磷酸化。

抗生素联合治疗的突破性发现

在抗生素（庆大霉素/多粘菌素/美罗培南）治疗模型中，单独使用抗生素需在感染后3小时内给药才能阻断肝脓肿形成。而NMN（500 mg/kg）联合延迟至4.5小时给药的抗生素，可使脓肿发生率从80%降至20%。这种协同效应与细菌清除无关（联合治疗未进一步降低肝脏CFU），而是通过抑制NF-κB通路活化，减少中性粒细胞（CD11b⁺Ly6G⁺细胞）浸润和IL-17α等促炎因子释放实现的。

其他NAD⁺前体的比较

烟酰胺核糖（NR）与NMN类似，能改善生存率并联合抗生素抑制脓肿形成，而烟酰胺（NAM）仅表现部分疗效。三者均未显示与抗生素的直接协同杀菌作用。

临床转化价值

该研究首次阐明：

1. hvKP肝脓肿形成需巨噬细胞介导的过度炎症反应，而非单纯细菌负荷；
2. NMN通过调控NAD⁺-NF-κB轴，为hvKP感染提供"免疫调节+抗菌"的新型联合治疗策略；
3. 建立的抗生素延迟给药动物模型，为肝脓肿机制研究提供标准化工具。

研究局限性

尽管发现NMN对急性期炎症的调控作用，但其在脓毒症免疫抑制期的疗效仍需验证。此外，NF-κB下游的关键效应分子有待进一步筛选。