鱼腥草提取物对糖尿病足溃疡分离菌株的体外抗菌活性研究及其临床意义

本研究针对抗生素滥用导致的细菌耐药性问题，探索了传统中药鱼腥草(Houttuynia cordata, HC)对糖尿病足溃疡(DFU)患者分离的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的抑制作用。通过临床随机对照试验和体外实验证实，HC对包括MRSA、CRPA和MDRPA在内的耐药菌株均表现出显著抑菌效果（MIC 31.25-125μg/mL），且无真核细胞毒性。该研究为开发DFU感染的新型替代疗法提供了科学依据，论文发表于《Hereditas》。

　　

在糖尿病成为全球健康威胁的今天，糖尿病足溃疡(DFU)作为最严重的并发症之一，正困扰着约30%的糖尿病患者。这些患者不仅要应对血糖控制的难题，更面临着足部感染带来的截肢甚至死亡风险。当前临床治疗主要依赖抗生素，但长期使用导致耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CRPA)等"超级细菌"层出不穷，使得治疗陷入僵局。面对这一困境，石家庄市中医院的研究团队将目光投向了传统中药鱼腥草(Houttuynia cordata, HC)——这种在中国广泛分布的植物，此前已被证实具有抗菌、抗病毒等多重功效，但对其在DFU感染治疗中的应用仍属空白。

研究人员采用三管齐下的策略展开探索：首先通过临床随机对照试验（72例DFU患者分组接受HC、甲氧西林和美罗培南治疗），发现HC组患者的肉芽组织面积显著增加（p<0.001），炎症标志物TNF-α和IL-6水平明显低于抗生素组；随后从患者创面分离出50株金黄色葡萄球菌和50株铜绿假单胞菌，筛选出MSSA、MRSA、CRPA和MDRPA四种典型菌株；最后通过体外实验结合细胞毒性评估，系统揭示了HC的抗菌潜力。关键技术包括：1）水提法制备HC提取物（浓度梯度1.95-1000μg/mL）；2）临床样本的Orbitrap Exploris 480质谱鉴定；3）微量肉汤稀释法测定MIC/MBC；4）生长曲线与时间-杀菌动力学分析；5）MTT法检测H6C7细胞活性。

研究结果部分呈现了系列重要发现：

Changes in clinical parameters of DFUs patients after HC treatment

临床数据显示，HC治疗14天后，患者肉芽组织面积、SIRS评分改善程度均显著优于抗生素组（p<0.001），血清TNF-α和IL-6水平分别降至75.38±14.10 pg/mL和73.61±9.38 pg/mL，证实HC能有效缓解DFU相关炎症反应。

Effect of HC on the circle of Inhibition

抑菌圈实验显示，HC对MSSA(S08)的抑制直径达15.45±0.12 mm（高度敏感），对MRSA、CRPA和MDRPA的抑制直径分别为12.64±0.09 mm、13.42±0.11 mm和11.23±0.08 mm（中度敏感），首次证实HC对耐药菌株仍保持活性。

MIC and MBC of HC

微量稀释法测定显示，HC对MSSA、MRSA、CRPA和MDRPA的MIC分别为31.25、62.5、62.5和125μg/mL，MBC分别为500、1000、1000和1000μg/mL，且所有菌株的MBC/MIC比值≤4，符合抑菌剂标准。

Growth curves demonstrate the inhibitory effect of HC on bacteria

生长曲线分析揭示，31.25μg/mL HC即可完全抑制MSSA生长（图2B），而62.5μg/mL能有效控制MRSA增殖（图2C）。相较于美罗培南对CRPA/D22的短暂抑制（<12小时），HC在62.5-125μg/mL浓度下可持续24小时抑制铜绿假单胞菌（图2E-F）。

Effect of HC on the time-kill curve

时间-杀菌曲线进一步验证，1×MIC浓度的HC能在24小时内完全抑制所有测试菌株（图3A-D），且杀菌效果呈浓度依赖性。

Cytotoxicity of HC assay

MTT实验证实，即使浓度高达250μg/mL，HC对正常胰腺导管上皮细胞(H6C7)的活性仍无显著影响（p<0.05），表明其具有优异的安全性（图4C）。

这项研究的重要价值在于：首次系统评估了HC对DFU相关病原菌（包括多重耐药株）的抑制作用，其抗菌谱覆盖了临床最常见的金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。特别值得注意的是，HC在远低于细胞毒性阈值（125μg/mL）的浓度下即可有效抑制耐药菌，这为开发兼具疗效和安全性的新型DFU治疗策略提供了可能。相较于传统抗生素，HC作为天然产物不易诱导耐药性，且具有抗炎、免疫调节等多重功效，符合当前"多靶点干预"的治疗理念。研究人员建议未来可探索HC与低剂量抗生素的联合方案，或通过纳米载体技术提高其局部给药浓度，从而更好地服务于临床需求。