硫霉素通过抑制肠道衰老及调控NF-κB/AMPK通路改善DSS诱导的小鼠结肠炎：网络药理学与实验验证

本研究通过网络药理学与实验验证，揭示了硫霉素（TP）通过抑制肠道细胞衰老、调控NF-κB/AMPK信号通路，显著改善DSS诱导的小鼠结肠炎。TP能下调促炎因子（IL-1/IL-6/TNF-α），恢复紧密连接蛋白（ZO-1/Occludin/Claudin-1）表达，为溃疡性结肠炎（UC）治疗提供新型抗衰老-抗炎协同策略。

　　

Highlight

细胞培养与衰老模型建立

人正常结肠上皮细胞系NCM460（货号CL0393）购自丰晖生物科技有限公司（湖南）。细胞采用含10%胎牛血清（FBS）、100 U/mL青霉素、0.1 mg/mL链霉素及2 mM L-谷氨酰胺的RPMI-1640培养基培养，置于37℃、5% CO₂培养箱中。为建立衰老模型，将NCM460细胞以4000个/cm²密度接种于24孔板，待融合度达50%时进行后续处理。

硫霉素（TP）可缓解DSS诱导的NCM460细胞衰老

基于实验室前期发现，3 μg/ml DSS能有效诱导NCM460细胞衰老（Zhou et al., 2024）。通过抗衰老-抗炎化合物库筛选，我们首次发现硫霉素（TP）可显著改善DSS诱导的细胞衰老表型。SA-β-gal染色显示，TP处理组蓝色颗粒状沉淀物减少约60%（p<0.01），同时衰老标志物p16^INK4a和p21蛋白表达下调。透射电镜观察到TP能恢复线粒体嵴结构，减少溶酶体堆积——这些结果生动揭示了TP"细胞年龄橡皮擦"的潜力。

结论

本研究通过"干湿结合"策略，系统阐明了TP通过多靶点作用缓解结肠炎的分子机制。有趣的是，TP像一位"信号通路调音师"，既能抑制NF-κB这个"炎症开关"，又能激活AMPK这个"能量传感器"，双管齐下改善肠道微环境。

讨论

细胞衰老在炎症疾病中的作用日益受到关注（Xie et al., 2023）。本研究首次提出TP通过"一石二鸟"机制——既清除衰老细胞"僵尸军团"，又修复紧密连接蛋白"城墙漏洞"。特别值得注意的是，TP对AMPK/NF-κB"跷跷板"平衡的调控，为开发"抗炎-抗衰老"双功能药物提供了新思路。