基于定量蛋白质组学与2D-DIGE技术解析四逆汤治疗心肌梗死的潜在作用靶点

本研究针对心肌梗死治疗机制不明确的问题，通过整合无标记定量蛋白质组学（label-free）和二维荧光差异凝胶电泳（2D-DIGE）技术，系统筛选出四逆汤（Sini Decoction）干预心肌梗死的潜在靶点。研究揭示了中药复方多组分协同作用的分子基础，为心血管疾病的中医药现代化研究提供了新思路。

　　

心血管疾病是全球致死率最高的疾病之一，其中心肌梗死（Myocardial Infarction, MI）因其复杂的病理机制，临床治疗仍面临巨大挑战。传统中药四逆汤（Sini Decoction）在心血管疾病治疗中具有悠久应用历史，但其多组分、多靶点的作用机制尚未完全阐明。如何系统解析中药复方的分子作用网络，成为中医药现代化研究的关键科学问题。

上海中医药大学药学院的研究团队在《Chinese Journal of Natural Medicines》发表研究，创新性地将无标记定量蛋白质组学（label-free quantitative proteomics）与二维荧光差异凝胶电泳（2D-DIGE）技术联用，首次从蛋白质组层面揭示了四逆汤干预心肌梗死的潜在作用靶点。研究通过建立心肌梗死动物模型，采用高分辨率质谱技术鉴定差异表达蛋白，并结合生物信息学分析构建了"药物-靶点-通路"网络。

关键技术包括：1）基于UHPLC-LTQ-Orbitrap MS的高通量蛋白质组学分析；2）2D-DIGE技术定量比较心肌组织蛋白表达差异；3）多元统计分析和代谢组学方法筛选生物标志物；4）质谱成像（MSI）技术可视化化学成分空间分布。

研究结果显示：

1. 差异蛋白筛选：通过2D-DIGE技术鉴定出心肌梗死组与四逆汤治疗组间显著差异表达的78个蛋白点，其中32个蛋白经质谱鉴定与能量代谢、氧化应激等通路相关。
2. 靶点网络构建：label-free定量分析发现四逆汤可显著调节ATP合成酶（ATP synthase）、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）等关键蛋白的表达水平。
3. 代谢标志物发现：非靶向代谢组学分析鉴定出8个潜在生物标志物，包括AC1-propanoic acid-3OH和HE-glucoside等二萜类生物碱衍生物。
4. 空间分布解析：MSI技术首次揭示附子（Aconiti Lateralis Radix Praeparata）中二萜类生物碱（diterpenoid alkaloids）的组织特异性分布特征。

讨论部分指出，该研究不仅阐明了四逆汤通过调控能量代谢和氧化应激通路发挥心肌保护作用的分子机制，还建立了中药复方系统药理学研究的新范式。特别是发现附子加工品（如黑顺片Heishunpian和白附片Baifupian）中二萜类生物碱的差异性分布规律，为中药炮制工艺优化提供了科学依据。

这项由Yang Yu、Changliang Yao等学者完成的研究，成功将现代组学技术与传统中医药研究相结合，其创新性体现在：1）首次系统绘制四逆汤干预心肌梗死的蛋白质组图谱；2）建立中药多组分空间代谢分析的标准化流程；3）为中药质量控制和临床合理用药提供了重要参考。研究结果对推动中医药国际化进程具有里程碑意义。