综述：cHCC-CCA类器官模型的新兴前沿：从干细胞创新到精准肿瘤学的桥梁

这篇综述系统阐述了利用成人干细胞（ASCs）和诱导多能干细胞（iPSCs）构建混合型肝癌-胆管癌（cHCC-CCA）类器官模型的最新进展，重点探讨了Lgr5+细胞分化、Hippo信号通路调控等机制，及其在疾病建模、药物筛选和个性化治疗中的应用潜力，为这一罕见肝脏恶性肿瘤的研究提供了创新技术路径。

　　

引言

原发性肝癌（PLC）是全球第六大高发恶性肿瘤，其中混合型肝癌-胆管癌（cHCC-CCA）占比0.4%-14.2%，具有病理特征复杂、治疗反应差的特点。传统研究受限于样本获取困难和动物模型与人体生理差异，而三维（3D）类器官技术的出现为cHCC-CCA研究开辟了新途径。

成人干细胞衍生的cHCC-CCA类器官模型

类器官技术能保留原发肿瘤的组织学特征和基因表达谱。2009年CLEVERS团队首次实现肠上皮类器官培养后，技术扩展至胚胎干细胞、iPSCs和组织驻留ASCs。ASCs具有自我更新和定向分化能力，且规避了伦理争议，成为构建cHCC-CCA模型的理想选择。

Lgr5⁺肝细胞衍生的胆管样类器官

Lgr5⁺作为干细胞标志物，在肝损伤模型中可形成长期存活的胆管样结构。Huch团队通过Wnt激动剂R-spondin的3D培养，证实Lgr5⁺肝祖细胞能分化为肝实质和胆管细胞，为cHCC-CCA建模提供新策略。

成人肝细胞衍生的类器官

肝细胞在3D培养中展现出更接近体内的功能特性。Sekiya发现Hippo通路激活是肝细胞成熟的关键，而Hui Lijian团队构建的人源肝类器官虽在代谢基因表达上与原代细胞存在差异，但为模拟cHCC-CCA病理状态提供了更优平台。

肿瘤细胞衍生的类器官

cHCC-CCA类器官能重现肿瘤微环境异质性。Nicole团队通过药物筛选证实其在新靶点发现和临床前测试中的价值，尤其在分析耐药性突变和微环境浸润方面具有独特优势。

iPSCs分化的cHCC-CCA类器官模型

iPSCs衍生的肝祖细胞

Takebe开创性工作证明iPSCs可分化为肝芽样结构，移植后具备部分肝组织功能。Shinozawa进一步优化步骤，通过二维诱导肝祖细胞后3D共培养，建立更接近发育微环境的类肝芽系统。

胆管样与肝样类器官

Akbari通过EpCAM⁺内胚层祖细胞分选提升构建效率，而Ouchi引入视黄酸（RA）生成含肝星状细胞和库普弗细胞的复合类器官，精准模拟了cHCC-CCA胆管病变。Sampaziotis团队则成功用该技术模拟Alagille综合征等胆管疾病。

应用前景

cHCC-CCA类器官在发病机制研究、高通量药物筛选（如Zhou团队抗寨卡病毒药物发现）和免疫治疗（淋巴细胞共培养）中展现巨大潜力。Smits的中脑类器官研究范式为其神经浸润研究提供参考。

总结与展望

当前技术仍面临培养周期长、培养基成分复杂等挑战，尤其血管网络和免疫细胞互作的模拟尚不完善。未来需开发整合全肝细胞谱系的成熟模型，结合CRISPR/Cas9基因编辑等技术，推动个体化治疗。建立大规模类器官样本库将加速精准医学进程。