解锁尼里拉维水牛乳β-酪蛋白中新型血管紧张素转换酶抑制肽：靶向水解、3D-QSAR建模与机制解析的协同策略

本研究首次从尼里拉维水牛乳β-酪蛋白（β-CN）中发掘血管紧张素转换酶抑制肽（ACEIPs），通过优化提取工艺（0.05 mol/L Ca2+浓度、pH调节溶解法及2°C冷藏6 h）和靶向酶解获得高活性水解物，结合3D-QSAR模型预测肽段活性，并借助分子对接（molecular docking）与动力学模拟（MD）揭示关键肽VSK（logIC50=1.14）通过氢键网络稳定结合ACE活性位点的分子机制，为天然降压肽的高效筛选提供新范式。

　　

Highlight
本研究通过系统优化尼里拉维水牛乳β-酪蛋白（β-CN@NRbm）的提取工艺（Ca²⁺浓度调控、溶解方法选择及冷藏时长），结合靶向酶解技术成功制备两种高ACE抑制活性的水解产物。基于乳源ACEIPs数据库构建的3D-QSAR模型，实现了水解物中88种肽段的活性预测，并筛选出活性差异显著的典型肽VSK与VFK（logIC₅₀相差2.11对数单位）。

Materials
实验采用广西水牛所提供的尼里拉维水牛乳，关键试剂包括美国Sigma公司提供的兔源ACE、组氨酸-组氨酸-亮氨酸（HHL）及尿酸，酶制剂（胃蛋白酶、蛋白酶K等）购自上海源叶生物科技有限公司，合成肽段由深圳华大基因提供。

Optimization of β-CN extraction process
通过调控Ca²⁺浓度（0.05 mol/L最佳）、采用pH调节溶解法及2°C冷藏6小时的三步优化策略，显著提升β-CN提取纯度与得率，为后续酶解提供优质底物。

Conclusion
研究证实尼里拉维水牛乳β-CN是优质ACEIPs来源，3D-QSAR模型预测与实验数据高度吻合，分子模拟揭示VSK通过构建多重氢键网络增强与ACE活性中心结合，其抑制机制解析为天然降压肽设计提供新思路。