埃塞俄比亚阿姆哈拉地区恶性疟原虫快速诊断靶基因pfhrp2/3缺失的流行病学调查及诊断策略优化研究

本研究针对恶性疟原虫(P. falciparum)快速诊断试纸条(RDTs)靶基因pfhrp2/3缺失导致的假阴性问题，在埃塞俄比亚阿姆哈拉地区28个卫生机构开展横断面调查。通过PCR检测1232例镜检阳性样本，发现pfhrp2/3基因缺失率高达88.3%，其中51.4%为双基因缺失。研究证实该地区缺失率远超WHO警戒阈值(5%)，为埃塞俄比亚全面转向LDH-based RDTs提供了关键证据。

　　

在非洲撒哈拉以南地区，疟疾仍是威胁公共健康的重大疾病，其中恶性疟原虫(P. falciparum)导致的死亡病例占全球95%。快速诊断试纸条(RDTs)作为资源有限地区的主要筛查工具，其核心检测靶标——组氨酸富集蛋白2/3(PfHRP2/3)的编码基因pfhrp2/pfhrp3的缺失问题日益凸显。这类基因缺失会导致RDT假阴性结果，使得携带缺失型疟原虫的患者无法获得及时治疗，同时造成耐药株的传播隐患。埃塞俄比亚作为疟疾流行区，2024年报告病例数同比激增78%，但关于pfhrp2/3缺失的系统性研究仍显不足。

针对这一关键问题，巴希尔达尔大学医学院的研究团队在阿姆哈拉地区开展了一项规模空前的流行病学调查。研究覆盖该地区三个疟疾流行域（贡德尔、戈贾姆和东阿姆哈拉）的28个卫生机构，采用WHO推荐的标准化监测方案，对1232例显微镜确认的P. falciparum感染者样本进行多维度分析。这项重要成果发表在《Malaria Journal》上，为非洲地区疟疾诊断策略的调整提供了决定性证据。

研究团队采用三种关键技术方法：首先通过显微镜和SD Bioline? PfHRP-2/pLDH RDT平行检测7529例发热患者；其次对123例RDT假阴性（镜检阳性/RDT阴性）和87例对照样本进行干血斑采样；最后采用实时多重PCR技术检测pfhrp2-exon 2、pfhrp3-exon 2及两个单拷贝参照基因（pfbt和pfldh），确保DNA质量控制。

主要研究结果

流行病学特征：在筛查的7529例发热患者中，镜检阳性率为22%（1659例），其中P. falciparum占71.1%（1177例）。值得注意的是，10%的镜检阳性样本（123/1232）出现RDT假阴性，提示可能存在pfhrp2/3缺失。

基因缺失模式：PCR确认的179例样本中，88.3%（158例）存在至少一个基因缺失。令人警惕的是，51.4%（92例）呈现pfhrp2/pfhrp3双缺失，2.2%（4例）为pfhrp2单缺失，34.6%（62例）为pfhrp3单缺失。在109例RDT假阴性样本中，93.6%可归因于基因缺失。

地理分布特征：缺失株广泛分布于26个卫生机构，其中安达萨卫生中心缺失率最高（8.9%）。双缺失比例在戈贾姆（53.7%）和贡德尔（53.5%）尤为突出，而东阿姆哈拉以pfhrp3单缺失为主（41%）。

讨论与意义

该研究首次揭示阿姆哈拉地区pfhrp2/3缺失率（88.3%）远超WHO设定的5%警戒阈值，且双缺失比例（51.4%）显著高于既往埃塞俄比亚报道（13.2%-23.6%）。这一发现解释了该国2024年疟疾病例激增的部分原因——长期使用PfHRP2-based RDTs可能对缺失株产生选择压力，导致漏诊病例成为传播源。

研究团队特别指出两个关键警示：首先，发现2例RDT阳性但PCR显示双基因缺失的样本，提示现有RDT可能存在交叉反应；其次，pfhrp3单缺失的高比例（34.6%）暗示该基因可能作为PfHRP2-based RDT的潜在替代靶标。基于这些发现，论文强烈建议埃塞俄比亚持续推广新型LDH-based Biocredit RDTs，并建立pfhrp2/3缺失的常态化监测机制。

这项研究为全球疟疾防控提供了重要范式：在基因缺失流行区，仅依靠单一抗原的RDTs可能造成重大诊断漏洞。研究结果已直接影响埃塞俄比亚国家疟疾指南的修订，也为其他非洲国家应对类似挑战提供了科学模板。随着疟原虫持续进化，这种多技术联用的监测策略将成为消除疟疾道路上的关键工具。