综述：AAV递送的基因编辑疗法治疗中枢神经系统疾病的趋势与挑战：对神经退行性疾病的启示

这篇综述深入探讨了AAV（腺相关病毒）递送CRISPR-Cas基因编辑系统治疗中枢神经系统（CNS）疾病的前景与挑战，聚焦阿尔茨海默病（AD）和帕金森病（PD）的临床前研究。文章系统分析了AAV载体的优化策略（如PHP.eB等新型衣壳）、CRISPR工具（如dSaCas9-KRAB-MeCP2表观编辑器）的递送瓶颈，以及靶向APOEε4和SNCA等关键基因的精准治疗路径，为神经退行性疾病的基因疗法提供了重要洞见。

　　

AAV-CRISPR系统靶向中枢神经系统的前景与挑战

病毒载体基因治疗是神经系统疾病的长效治疗策略。AAV因其低免疫原性、组织特异性及非整合特性成为CNS递送的黄金标准。然而其~4.7 kb的包装容量限制了CRISPR-Cas系统的递送，尤其是SpCas9（4.2 kb）等大体积效应蛋白。通过微型化改造（如SaCas9仅3.1 kb）或拆分双AAV策略（如v3em PE-AAV实现42%脑编辑效率）可部分解决该问题。

新型工程化AAV衣壳的突破

CREATE技术衍生的PHP.eB和CAP-B22等衣壳显著提升BBB穿透能力，在灵长类中实现神经元特异性转导。例如AAV-CAP-B10在狨猴脑部的转导效率较AAV9提高5倍，同时肝脏脱靶降低20倍。而rAAV2-retro支持逆向运输，可靶向投射神经元网络。

CRISPR工具箱的革新

从传统Cas9到超紧凑Cas12f（1.3 kb）和RNA靶向Cas13d（2.8 kb），编辑工具持续进化。其中，碱基编辑器（CBE/ABE）可精确修正APOEε4→ε3，而表观编辑器dCas9-KRAB-MeCP2通过甲基化SNCA内含子1实现30%表达下调，缓解PD模型病理。

AD治疗：APOE靶向策略

APOEε4是AD最强遗传风险因子，其致病机制涉及Aβ清除障碍。AAV递送的dSaCas9-KRAB-MeCP2系统可抑制75%小鼠ApoE表达；而AAVrh.10-APOE2^Christchurch（R136S）通过过表达保护性变体，在AD小鼠中同时减少淀粉样斑块和tau缠结。

PD治疗：SNCA调控艺术

SNCA基因剂量与α-突触核蛋白聚集直接相关。LV递送的dCas9-DNMT3A通过甲基化SNCA内含子1调控表达，在PD患者iPSC衍生多巴胺神经元中挽救线粒体功能障碍。针对A53T突变体的SaCas9-KKH编辑则显著改善大鼠模型运动症状。

挑战与展望

免疫原性、肝脏脱靶和递送效率仍是主要障碍。未来需结合非侵入性给药（如聚焦超声）、miRNA去靶化（如miR-122抑制肝脏表达）和细胞特异性启动子（TH/ChAT）优化治疗窗口。随着GMP级AAV生产和临床转化推进，精准基因编辑有望重塑神经退行性疾病治疗格局。