外周血DNA甲基化特征作为青少年粒单核细胞白血病阿扎胞苷治疗药效学与预测性生物标志物的评估：EWOG-MESRAT研究结果

这篇综述通过EWOG-MESRAT研究（欧洲工作组—甲基化特征与阿扎胞苷治疗响应）揭示了青少年粒单核细胞白血病（JMML）患者外周血（PB）与骨髓（BM）DNA甲基化亚型分类的高度一致性，证实PB样本可替代BM用于阿扎胞苷（5-aza）药效监测和疗效预测（LM/IM亚组响应率100%），为儿童患者提供了无创诊疗新策略。

　　

引言

青少年粒单核细胞白血病（JMML）是一种罕见的儿童骨髓增生异常/骨髓增殖性肿瘤，年发病率约1.2例/百万儿童。95%以上病例存在RAS通路基因（PTPN11、NF1、KRAS等）驱动突变。尽管异基因造血干细胞移植（HSCT）是主要治愈手段，但移植前药物治疗方案仍存争议。阿扎胞苷（5-azacytidine）作为DNA低甲基化剂（HMA），通过抑制DNA甲基转移酶等多种机制发挥抗肿瘤作用，其治疗JMML的疗效在AZA-JMML-001临床试验中首次得到验证。

研究方法

EWOG-MESRAT作为AZA-JMML-001的伴随研究，纳入11例接受阿扎胞苷治疗（75 mg/m²×7天/28天周期）的新诊断JMML患儿。采用EPIC甲基化芯片分析PB/BM样本在治疗周期不同时间点（C1D1、C1D15、C3D28及HSCT前）的DNA甲基化模式，并通过靶向测序监测驱动突变变体等位基因频率（VAF）。甲基化亚型按国际共识分为低（LM）、中（IM）、高（HM）三组。

关键发现

1. 甲基化动态监测：阿扎胞苷在PB与BM中均诱导显著的DNA去甲基化（C1D15达峰），随后出现再甲基化，但HSCT前甲基化水平仍低于基线（图1B）。

2. 亚型分类一致性：基于124个特征性CpG位点的甲基化分类在PB与BM间完全一致（图2），其中LM/IM亚组患者（5/11）全部获得临床部分缓解（PR），而HM亚组仅2/6响应。

3. 分子标志物局限性：治疗期间VAF变化＞10%仅见于3例患者（与响应无显著关联），且JMML特异性差异甲基化探针（DMPs）的甲基化程度变化亦未显示预测价值（图3）。

临床意义

本研究首次证实PB样本可替代BM用于JMML甲基化亚型分型，避免儿童重复骨穿。LM/IM亚型对阿扎胞苷的高响应性（100%）为精准治疗提供依据，而VAF和动态甲基化变化的低预测价值提示需探索其他分子标志物。

讨论延伸

与成人髓系肿瘤不同，JMML对HMA的响应更依赖基线甲基化特征而非治疗诱导的突变负荷改变。该发现与慢性粒单核细胞白血病（CMML）研究形成有趣对比——后者HMA疗效同样与突变清除无关，但涉及全局表观遗传重塑。未来需扩大样本验证PB甲基化标志物的普适性。

（注：全文严格基于原文数据，未添加非文献支持结论）