后下丘脑神经降压素表达受吻素水平调控的机制研究：基于大鼠模型与下丘脑细胞模型的发现

这篇研究揭示了神经降压素（NT）在下丘脑-垂体-性腺轴（HPG轴）中的调控机制，通过大鼠模型和三种下丘脑细胞模型（GT1-7、rHypoE-8、mHypoA-55）证实：卵巢切除（OVX）通过升高吻素（Kiss-1）表达间接促进NT表达，而雌激素（E2）、孕酮（P4）和双氢睾酮（DHT）可抑制这一过程。研究首次提出NT与Kiss-1/kisspeptin的互作网络依赖ERK通路，为HPG轴负反馈机制提供了新视角。

　　

1. 引言

女性生殖系统的稳态由下丘脑-垂体-性腺（HPG）轴精密调控，其中表达吻素（kisspeptin，由Kiss-1基因编码）的神经元位于该轴顶端，通过调控促性腺激素释放激素（GnRH）分泌主导下游内分泌活动。啮齿类动物中，位于下丘脑视前区（AVPV）的Kiss-1神经元参与GnRH的激增分泌，诱导黄体生成素（LH）峰触发排卵；而弓状核（ARC）的Kiss-1神经元则调控GnRH的基础脉冲分泌。两类神经元分别介导雌激素（E₂）的正反馈与负反馈机制。

ARC区的Kiss-1神经元共表达吻素、神经激肽B（NKB）和强啡肽（Dyn），被称为KNDy神经元，其通过NKB和Dyn的突触信号同步振荡，充当GnRH脉冲发生器。然而，KNDy神经元是否独立发挥此功能，或其他神经因子是否参与调控仍不明确。

神经降压素（NT）是一种具有血管活性的神经肽，广泛分布于中枢神经系统，尤其在富含Kiss-1神经元的下丘脑区域高表达。既往研究表明，NT可调节垂体激素（如生长激素、促肾上腺皮质激素）分泌，但其在HPG轴中的作用机制尚未阐明。

2. 材料与方法

研究采用6周龄雌性Wistar大鼠，通过卵巢切除术（OVX）模拟E₂缺失状态，并补充E₂、P4或DHT。下丘脑后部（含ARC区）组织用于检测NT与Kiss-1 mRNA表达。细胞实验选用GT1-7（GnRH神经元模型）、rHypoE-8（胚胎大鼠下丘脑细胞）和mHypoA-55（KNDy神经元模型），通过qRT-PCR和Western blot分析基因与蛋白表达。

3. 结果

3.1 OVX与E₂对下丘脑NT表达的影响

OVX使下丘脑后部NT mRNA表达显著升高1.53倍，而E₂补充完全逆转此效应。在完整卵巢大鼠中，E₂直接降低NT表达至对照组的0.6倍，表明E₂在体内对NT呈负调控。

3.2 性类固醇的调控作用

P4和DHT同样抑制OVX诱导的NT表达升高，但在完整卵巢大鼠中抑制作用弱于E₂。值得注意的是，OVX使Kiss-1表达激增44.34倍，而E₂、P4和DHT均能完全抑制此现象，提示NT与Kiss-1的调控模式高度相似。

3.3 下丘脑细胞模型的互作机制

在GT1-7细胞中，E₂使NT表达小幅增加1.67倍，而吻素刺激显著提升NT表达1.85倍；rHypoE-8细胞中，吻素的诱导效应更强（4.41倍）。KNDy神经元模型mHypoA-55中，吻素以剂量依赖性方式使NT表达升高2.13倍。相反，NT对Kiss-1的调控作用较弱，仅在rHypoE-8细胞中引起1.96倍小幅增加。

3.4 ERK通路的介导作用

MEK抑制剂U0126可完全阻断吻素诱导的NT表达升高，证实ERK信号通路在此过程中起核心作用。

4. 讨论

研究首次揭示：OVX通过解除E₂对Kiss-1的抑制，间接驱动下丘脑后部NT表达升高，而吻素-NT的正反馈环路依赖ERK通路激活。这一发现挑战了“NT直接介导E₂信号”的传统假设，提出NT更可能是Kiss-1神经元的下游效应分子。

5. 结论

下丘脑后部NT表达受吻素/Kiss-1级联调控，二者协同响应性类固醇的负反馈信号。该机制为HPG轴失调相关疾病（如多囊卵巢综合征）提供了潜在干预靶点。