膳食亚硝酸盐通过增强整合素αM（Itgam）加剧MRL/lpr小鼠狼疮病程的机制研究

这篇研究揭示了膳食亚硝酸盐(NO2?)通过激活整合素αM(Itgam)相关细胞黏附分子通路，显著加剧MRL/lpr小鼠狼疮(SLE)进展。研究发现亚硝酸盐暴露导致脾脏双阴性T细胞(DN T)、滤泡辅助T细胞(Tfh)和浆细胞扩增，同时降低调节性T细胞(Treg)，并伴随血清抗dsDNA抗体、促炎因子(IL-12p70/TNF-α)升高及肾脏病理损伤。通过转录组分析和整合素拮抗剂lifitegrast干预，证实Itgam是亚硝酸盐加剧狼疮的关键介质，为SLE环境风险因素防控提供了新靶点。

　　

引言

亚硝酸盐(NO₂^?)作为食品防腐剂和环境污染物，其与自身免疫疾病的关联日益受到关注。既往研究表明，血清氮氧化物水平与狼疮肾炎(LN)疾病活动度呈正相关，但其在系统性红斑狼疮(SLE)中的具体机制尚未阐明。MRL/lpr小鼠作为经典的自发性狼疮模型，能模拟人类SLE的免疫紊乱和多器官损伤特征，为探究环境因素对狼疮的影响提供了理想平台。

方法

研究采用8周龄雌性MRL/lpr小鼠，通过饮水暴露低(0.1 g/L)和高剂量(0.3 g/L)亚硝酸钠12周。通过流式细胞术分析脾脏免疫细胞亚群（DN T、Tfh、Treg和浆细胞），ELISA检测血清抗双链DNA抗体(anti-dsDNA)、抗核抗体(ANA)及炎症因子(IL-12p70/TNF-α)，并评估肾脏病理损伤。转录组测序筛选差异表达基因(DEGs)，Western blot验证关键蛋白表达。进一步采用整合素拮抗剂lifitegrast(15 mg/kg/周)干预，明确Itgam的调控作用。

结果

亚硝酸盐加剧狼疮表型：高剂量亚硝酸盐组小鼠血清anti-dsDNA和ANA水平较模型组升高2.1倍和1.8倍（p<0.01），尿蛋白含量在20周龄时增加3倍。肾脏H&E染色显示肾小球新月体形成和炎性浸润加重，免疫荧光显示IgG和补体C3沉积显著增强。

免疫细胞失衡：亚硝酸盐暴露导致脾脏指数增加2.3倍，脾脏DN T细胞比例从12.4%升至24.7%，Tfh细胞从5.8%增至11.2%，而Treg细胞从8.3%降至4.1%（p均<0.05），提示免疫稳态破坏。

转录组学特征：脾脏和肾脏组织分别鉴定出505和1245个DEGs，共同富集于细胞黏附分子、破骨细胞分化和B细胞受体(BCR)信号通路。其中Itgam和Cadm1基因在两组中均显著上调，但仅Itgam蛋白表达增加1.9倍（p<0.01）。

干预实验验证：lifitegrast处理使Itgam表达降低57%，同时缓解脾肿大（脾脏指数下降41%）、减少DN T细胞浸润（18.2% vs 24.7%），并改善肾小球IgG沉积（荧光强度降低62%）。

讨论

本研究首次揭示膳食亚硝酸盐通过Itgam依赖性途径加剧狼疮的分子机制。Itgam作为Mac-1整合素亚基，其过表达促进白细胞迁移和炎症反应，与SLE遗传易感性位点吻合。环境因素（如亚硝酸盐）与遗传背景（MRL/lpr小鼠Fas基因缺陷）的交互作用，可能是触发自身免疫的重要环节。值得注意的是，亚硝酸盐诱导的Treg减少可能通过削弱免疫耐受而加速疾病进展。

结论

该研究为SLE的环境风险防控提供了实验依据，提示限制亚硝酸盐摄入和靶向Itgam可能是狼疮管理的潜在策略。未来需进一步探索亚硝酸盐在人类SLE中的剂量效应关系及Itgam调控的上游信号网络。