卵黄免疫球蛋白(IgY)抗体的制备及其在米酵菌酸异构体免疫层析检测中的应用研究

本文创新性地利用伯克霍尔德菌(BGC)产生的米酵菌酸(BA)及其异构体(IsoBA)制备高亲和力IgY抗体，开发了智能手机集成的免疫层析检测(ICA)方法。相比单克隆抗体(mAb)，该技术具有非侵入性生产、高产率、耐有机溶剂等优势，检测限达0.42 μg/kg，为食品安全快速检测提供了符合动物伦理的新型解决方案。

　　

Highlight亮点

本研究突破性地采用伯克霍尔德菌(Burkholderia gladioli pv. Cocovenenans, BGC)直接发酵产生的粗制米酵菌酸(cBA)作为免疫原，成功制备出对米酵菌酸(BA)及其异构体(IsoBA)具有高特异性的卵黄免疫球蛋白(IgY)。相比传统单克隆抗体(mAb)，该IgY展现出卓越的有机溶剂耐受性（可承受30%甲醇），为简化样品前处理流程奠定基础。

Characterization of artificial antigen人工抗原表征

作为小分子物质（分子量：486.605），BA单独使用时难以有效激发机体免疫应答。本研究创新性地将BGC产生的cBA与载体蛋白偶联制备完全抗原，经LC-MS/MS验证获得理想对称色谱峰，质谱分析显示典型[M-H]^-离子峰(m/z 485.6)，为后续免疫制备提供高质量抗原。

Conclusions结论

本研究通过BGC培养获得cBA并成功免疫母鸡，制备出性能优异的抗BA IgY抗体。基于此开发的智能手机集成ICA检测技术，将检测时间缩短约10分钟（相比商业ICA），定量检测限(qLOD)达0.42 μg/kg，目视检测限(vLOD)为16.00 μg/kg，与LC-MS/MS结果高度一致。该技术兼具高产率、动物伦理合规性和有机溶剂耐受性等优势，为商业化ICA开发提供新选择。