免疫检查点变化与肌萎缩侧索硬化症（ALS）进展及预后的相关性研究

这篇研究通过流式细胞术和Luminex技术揭示了肌萎缩侧索硬化症（ALS）患者外周血CD4+T细胞中PD-1表达升高（尤其Th9/Th17亚群），且血清中sPD-1/sBTLA/sCTLA-4/sCD27等14种免疫检查点分子显著变化，证实其与疾病进展（ALSFRS-R评分下降）和不良预后相关，为ALS的免疫机制研究和生物标志物开发提供了新方向。

　　

背景

肌萎缩侧索硬化症（ALS）是一种致死性神经退行性疾病，以运动神经元进行性丢失为特征，目前缺乏早期诊断和预后评估的可靠生物标志物。近年研究发现免疫系统异常在ALS发病中起关键作用，尤其是免疫检查点分子（如PD-1/PD-L1通路）可能参与调控。既往研究提示SOD1转基因小鼠和ALS患者血清中PD-1/PD-L2水平升高，但膜结合型PD-1的表达谱及其与临床参数的关系尚未阐明。

方法

研究分两阶段进行：

1. 流式细胞术队列：纳入72名受试者（46例ALS，26名健康对照），分析CD4⁺T细胞及其亚群（Th1/Th2/Th9/Th17/Tfh）的PD-1表达；

2. Luminex队列：93名受试者（44例ALS，30名对照，19例ALS mimics）检测14种血清免疫检查点分子（如sPD-1/sTIM-3/sCTLA-4等），同时用SIMOA技术定量神经丝轻链（NFL）。所有ALS患者随访12个月，记录ALSFRS-R评分和终点事件（机械通气/死亡）。

结果

1. PD-1表达特征：ALS患者CD4⁺T细胞中PD-1比例显著高于对照（8.36% vs 5.15%），且Th9和Th17亚群PD-1表达更高。PD-1⁺CD4⁺T细胞比例>8%的患者终点事件发生率显著增加。

2. 血清检查点分子：sPD-1、sBTLA、sCTLA-4、sCD27在ALS组中均升高；sTIM-3与ALSFRS-R评分负相关，sPD-L1则同时与ALSFRS-R负相关、与NFL正相关。

3. 年龄分层：年轻ALS患者sPD-1/sBTLA/sIDO升高更明显，而sCD27/sGITR在老年和年轻ALS中均显著上调。

讨论

PD-1高表达可能通过IDO-Kyn-AchR通路激活，促进Th17细胞分泌IL-17A，加剧神经炎症。多种免疫检查点分子（如sTIM-3/sPD-L1）与疾病严重程度相关，提示外周免疫耐受失衡可能驱动ALS进展。值得注意的是，膜结合型PD-1与血清可溶性分子可能通过不同机制参与病理过程，例如sCD80可拮抗PD-1/PD-L1抑制信号，而sCD137可能抑制Th1/Th2极化。

局限性

研究未解析其他膜结合型检查点分子的表达，且缺乏纵向动态监测数据。家族性ALS病例因伦理限制未纳入遗传分析，未来需扩大样本验证。

结论

该研究首次系统揭示了ALS患者外周免疫检查点网络的广泛失调，特别是PD-1在CD4⁺T细胞亚群的异常表达与快速进展相关，为免疫治疗靶点选择提供了理论依据。血清sPD-1/sTIM-3等分子有望成为ALS预后评估的新标志物。