冷冻消融联合PD-1抑制剂通过JAK2-STAT3-S100A8/A9轴调控髓系来源抑制细胞（MDSCs）抑制Lewis肺癌进展的机制研究

这篇研究揭示了冷冻消融（Cryo）联合PD-1抑制剂通过调控JAK2-STAT3-S100A8/A9信号轴，显著抑制Lewis肺癌（LLC）小鼠模型中髓系来源抑制细胞（MDSCs）的免疫抑制功能，促进CD8+T细胞活化，改善肿瘤微环境（TME），为肺癌联合治疗提供新策略。

　　

背景

肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，免疫检查点抑制剂（ICIs）虽改善了非小细胞肺癌（NSCLC）患者的生存，但单药客观缓解率仅20%-30%。髓系来源抑制细胞（MDSCs）在肿瘤微环境（TME）中通过多种机制抑制抗肿瘤免疫，其积累与PD-1抑制剂耐药密切相关。冷冻消融（Cryo）通过释放肿瘤抗原激活免疫应答，但单独应用效果有限。本研究探索Cryo联合PD-1抑制剂通过调控MDSCs功能增强抗肿瘤效应的机制。

材料与方法

建立Lewis肺癌（LLC）双侧荷瘤小鼠模型，分为对照组、Cryo组、PD-1抑制剂组（In-PD-1）和联合治疗组（Comb）。通过流式细胞术分析MDSCs（CD11b⁺Gr-1⁺）及其亚群M-MDSCs（Ly6C⁺）和G-MDSCs（Ly6G⁺）比例，检测CD8⁺T细胞浸润。qRT-PCR和Western blot评估免疫抑制相关分子（iNOS、Arg-1、TGF-β、S100A8/A9）及JAK2-STAT3通路蛋白表达。

结果

1. 协同抑瘤效应：Comb组未处理的右侧肿瘤生长显著抑制，瘤重减轻，小鼠生存期延长。Western blot显示Cleaved Caspase-3和Bax表达上调，Bcl-2下调，提示联合治疗促进肿瘤细胞凋亡。

2. MDSCs调控：Comb组肿瘤组织和外周血中MDSCs比例降低，M-MDSCs减少最显著。MDSCs成熟标志MHCII和CD86表达增加，免疫抑制分子iNOS、Arg-1、S100A8/A9 mRNA和蛋白水平下降。

3. 免疫微环境重塑：Comb组CD8⁺T细胞比例显著升高，伴随JAK2、STAT3磷酸化及S100A8/A9表达抑制，证实JAK2-STAT3-S100A8/A9轴在MDSCs功能调控中的核心作用。

讨论

研究首次阐明Cryo+PD-1抑制剂通过阻断JAK2-STAT3-S100A8/A9通路，双重调控MDSCs的增殖（减少数量）和功能（促进成熟），逆转TME免疫抑制。S100A8/A9作为STAT3下游靶点，其下调可减少MDSCs向肿瘤迁移，与既往报道的STAT3抑制剂作用机制一致。临床转化意义在于：①为PD-1耐药患者提供联合治疗新方案；②S100A8/A9或可作为疗效预测标志物。

结论

Cryo与PD-1抑制剂的协同抗肿瘤效应依赖于对MDSCs的靶向调控，该发现为肺癌及其他实体瘤的免疫联合治疗提供了理论依据和潜在干预靶点。