基于网络药理学的无多糖枸杞提取物治疗慢性肾脏病机制研究及动物模型验证

这篇研究采用网络药理学结合动物实验，首次系统阐明了无多糖枸杞提取物（ELB）治疗慢性肾脏病（CKD）的多靶点作用机制。通过85%乙醇回流提取获得ELB，鉴定出34种活性成分（如槲皮素）作用于39个CKD相关靶点（IL-6/VEGFA等），调控AGE-RAGE/HIF-1等关键通路。5/6肾切除大鼠模型证实ELB可显著降低血清BUN/SCr水平，抑制肾组织IL-6和VEGF表达，为开发新型CKD治疗策略提供实验依据。

　　

引言

慢性肾脏病（CKD）作为全球公共卫生问题，现有治疗手段存在明显局限性。传统中药枸杞的活性成分研究长期聚焦于枸杞多糖（LBP），而其他组分如无多糖枸杞提取物（ELB）的肾保护机制尚属空白。本研究创新性地采用85%乙醇回流提取工艺，通过真空浓缩和梯度洗脱去除多糖成分，经苯酚-硫酸法验证获得完全不含多糖的ELB，为揭示枸杞非多糖成分的药理价值提供了全新视角。

材料与方法

研究团队建立了系统的网络药理学分析流程：从TCMSP数据库筛选ELB的188种化学成分，根据口服生物利用度（OB≥30%）和类药性（DL≥0.18）标准锁定34个活性化合物。通过UniProt数据库映射94个人类靶点基因，与OMIM/TTD数据库的940个CKD相关基因取交集，发现39个关键重叠基因。采用Cytoscape构建化合物-靶点网络，STRING数据库构建蛋白互作网络（PPI），DAVID进行GO/KEGG通路富集分析。动物实验采用5/6肾切除（5/6 Nx）SD大鼠模型，设置6/12/24 g/kg三个剂量组，通过H&E染色、血清BUN/SCr检测及Western blot验证关键靶点。

结果

化学分析显示ELB富含黄酮类（如槲皮素）、三萜类和植物甾醇。网络拓扑分析发现槲皮素作用靶点最多（12个），与IL-6、VEGFA、CASP3等核心靶点密切关联。PPI网络鉴定出6个枢纽基因：IL-6（连接度32）、VEGFA（28）、CASP3（26）、EGFR（24）、ESR1（22）和PPARG（20）。KEGG分析揭示ELB主要调控AGE-RAGE、HIF-1、TNF和PI3K-Akt等91条显著通路（p<0.05），涉及氧化应激、炎症反应和细胞凋亡等生物学过程。

动物实验证实，ELB中剂量（12 g/kg）治疗显著改善5/6 Nx大鼠肾小球萎缩和肾小管空泡化，血清BUN从28.7±3.2降至18.5±2.1 mg/dL（p<0.05），SCr从0.82±0.11降至0.53±0.08 mg/dL。Western blot显示ELB剂量依赖性抑制肾组织IL-6（下降62%）和VEGF（下降55%）蛋白表达，与网络预测高度吻合。

讨论

研究首次阐明ELB通过"多成分-多靶点-多通路"协同发挥肾保护作用：①植物甾醇（如β-谷甾醇）调节NR3C2/PPARG抑制炎症；②三萜类激活Nrf2抗氧化通路；③槲皮素作为核心成分，通过阻断EGFR/CASP3凋亡通路、下调IL-6炎症因子及调控VEGFA介导的血管通透性实现多重保护。特别值得注意的是，ELB对AGE-RAGE通路的调控可能延缓糖尿病肾病进展，这为代谢异常相关CKD提供了潜在治疗策略。

结论与展望

该研究突破性地证实无多糖枸杞提取物ELB具有不逊于LBP的肾保护功效，其通过槲皮素等活性成分协同调控炎症-氧化应激-纤维化网络。未来需开展临床剂量探索（建议参考6-24 g/kg动物剂量换算）和制剂优化研究，同时需关注长期用药安全性。这种基于传统中药"去粗取精"的研究策略，为开发精准化CKD治疗药物提供了新思路。