德国森林工人中抗Bartonella schoenbuchensis-IgG抗体的血清阳性率未升高：削弱鹿虻传播假说的证据

研究人员针对鹿虻(Lipoptena cervi)可能传播Bartonella schoenbuchensis的假说，通过建立免疫荧光分析(IFA)和蛋白质印迹技术，比较了82名森林工人(FW)与118名非森林工人(NFW)的血清学数据。结果显示两组人群的IgG抗体阳性率无显著差异(54.9% vs 66.1%，cut-off≥320)，表明该病原体通过鹿虻传播至人类的风险较低，为公共卫生风险评估提供了重要依据。

　　

在德国森林中，一种名为鹿虻(Lipoptena cervi)的吸血昆虫长期困扰着林业工作者。这种寄生虫主要寄生于马鹿、狍等有蹄类动物，偶尔也会攻击人类，引发被称为"鹿虻皮炎"的瘙痒性丘疹。更令人担忧的是，鹿虻被证实携带一种名为Bartonella schoenbuchensis的细菌，该病原体在媒体渲染下被冠以"致命心内膜炎病原体"的骇人称号，引发了公众恐慌。然而，这种细菌是否真的会通过鹿虻传播给人类？其致病风险究竟如何？这些问题长期缺乏科学证据。

法兰克福大学医院医学微生物学和感染控制研究所（Institute for Medical Microbiology and Infection Control, University Hospital, Goethe University）的Kim Nina Buntrock领衔的研究团队在《Parasites 》发表论文，首次系统评估了职业暴露人群的感染风险。研究人员采用CDC推荐的标准化流程，建立了基于Vero E6细胞的免疫荧光分析(IFA)方法，并辅以蛋白质印迹和质谱技术，对200份人血清样本（82名森林工人和118名对照）进行了系统检测。

关键技术包括：1）建立细胞培养衍生的B. schoenbuchensis抗原；2）开发特异性免疫荧光分析(IFA)方法；3）通过蛋白质印迹分析血清反应性；4）利用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)鉴定免疫优势蛋白；5）采用商业诊断试剂评估血清交叉反应性。样本来自北莱茵-威斯特法伦州的职业暴露队列。

【结果分析】

免疫荧光分析方法的建立

研究人员优化了抗原制备流程，比较了HeLa-229和Vero E6细胞的感染效率，最终选择后者作为标准化基质。通过平行实验验证，建立的IFA方法能稳定检测兔抗B. schoenbuchensis血清，效价达1:6,400。

血清学检测结果

在cut-off值设为320时，森林工人组(FW)阳性率为54.9%(45/82)，反而略低于对照组(NFW)的66.1%(78/118)。提高阈值至640后，两组阳性率分别为18.3%(15/82)和20.3%(24/118)，无统计学差异(p>0.05)。

蛋白质印迹与质谱分析

Western blot检测到40-300 kDa范围内的多条反应带，经LC-MS/MS鉴定出166种B. schoenbuchensis蛋白，包括DNA定向RNA聚合酶β亚基(FFM_00798)、伴侣蛋白DnaK(FFM_00274)等。但森林工人组的条带反应强度总和(0.1-9分)与对照组无显著差异。

交叉反应分析

对21份强阳性血清的进一步检测显示，所有样本均至少与一种其他病原体发生交叉反应，其中86%与肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)、78%与肺炎衣原体(Chlamydophila pneumoniae)存在交叉反应，提示现有检测方法的特异性有待提高。

【结论与意义】

这项研究通过系统血清学调查，首次证明职业暴露于鹿虻的森林工人并未表现出更高的B. schoenbuchensis感染率。结果直接挑战了"鹿虻传播B. schoenbuchensis致人感染"的主流假说，为平息公共卫生争议提供了关键证据。质谱鉴定的免疫优势蛋白为未来开发特异性诊断标记奠定了基础，而发现的广泛血清交叉反应则提示需要改进现有检测方法。从公共卫生角度看，这些发现有助于纠正媒体夸大报道造成的恐慌，指导职业暴露人群的风险评估。值得注意的是，德国生物安全中央委员会(ZKBS)曾将该菌列为"具有人畜共患潜力"的病原体，本研究结果对此分类提出了质疑，建议重新评估其风险等级。