雄激素受体通过NEDD4L介导的SLC7A11泛素化调控抑制铁死亡并促进去势抵抗性前列腺癌恩杂鲁胺耐药

本研究针对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)患者对恩杂鲁胺(Enz)产生耐药性的临床难题，揭示了雄激素受体(AR)通过下调E3泛素连接酶NEDD4L稳定SLC7A11蛋白表达的新机制。研究人员发现Enz通过AR/NEDD4L/SLC7A11信号轴抑制铁死亡(ferroptosis)，而联合使用SLC7A11抑制剂erastin可显著增强肿瘤抑制效果。该研究为克服CRPC耐药提供了新的靶向治疗策略。

　　

前列腺癌作为威胁男性健康的第二大恶性肿瘤，其治疗面临严峻挑战。虽然雄激素剥夺疗法(ADT)初期效果显著，但绝大多数患者最终会进展为去势抵抗性前列腺癌(CRPC)。第二代雄激素受体抑制剂恩杂鲁胺(enzalutamide, Enz)的出现虽然延长了患者生存期，但约42%的患者在11.2个月内就会产生耐药性。这种耐药现象与铁死亡(ferroptosis)抵抗密切相关，但具体机制尚不清楚。

南京医科大学附属第一医院的研究人员针对这一临床难题展开深入研究，发现Enz通过稳定SLC7A11蛋白抑制铁死亡，从而促进CRPC耐药。这项发表在《Cell Death and Disease》的重要研究揭示了AR/NEDD4L/SLC7A11信号轴在调控铁死亡和药物耐药中的关键作用，为克服CRPC耐药提供了新的治疗靶点。

研究人员采用的主要技术方法包括：构建恩杂鲁胺耐药细胞株、谷胱甘肽(GSH)含量测定、不稳定铁池(LIP)检测、线粒体活性氧(ROS)分析、线粒体膜电位(JC-1)测定、蛋白质稳定性实验、分子对接预测、免疫共沉淀(co-IP)验证以及裸鼠异种移植模型等。

研究结果部分：

恩杂鲁胺下调CRPC前列腺癌细胞铁死亡指标

通过检测不同浓度Enz处理的CRPC细胞系(C4-2和22RV1)，发现GSH含量、过氧化物酶活性呈剂量依赖性增加，线粒体膜电位得以维持，而线粒体ROS和LIP水平显著降低。这些指标变化表明Enz能有效抑制铁死亡。

SLC7A11调控恩杂鲁胺诱导的CRPC细胞铁死亡

Western blot显示Enz显著上调SLC7A11蛋白表达，而对GPX4和PRDX6无影响。AR过表达实验证实Enz通过AR调控SLC7A11表达。SLC7A11敲除后，铁死亡指标明显升高，而SLC7A11过表达则增强细胞对Enz的耐药性。联合使用SLC7A11抑制剂erastin可显著抑制耐药细胞增殖。

SLC7A11可能受AR转录后调控

mRNA水平检测发现Enz不影响SLC7A11转录。蛋白质稳定性实验表明SLC7A11受蛋白酶体降解调控。通过UbiBrowser数据库预测和转录因子分析，鉴定出NEDD4L可能是连接AR和SLC7A11的关键E3泛素连接酶。分子对接显示NEDD4L与SLC7A11具有高亲和力(-25.589 kcal/mol)，免疫共沉淀实验进一步证实了两者的直接相互作用。

体内实验证实靶向SLC7A11可增强恩杂鲁胺敏感性

裸鼠移植瘤实验显示，Enz(10 mg/kg/day)或erastin(20 mg/kg/day)单药治疗均能抑制肿瘤生长，而联合治疗组效果更显著。肿瘤体积和重量测量证实靶向SLC7A11可有效逆转Enz耐药。

这项研究首次揭示了Enz通过AR介导的NEDD4L下调稳定SLC7A11蛋白，增强胱氨酸摄取和GSH合成，从而抑制铁死亡并促进CRPC耐药的分子机制。研究不仅阐明了AR/SLC7A11/铁死亡轴在Enz耐药中的关键作用，还通过体内外实验证实联合靶向SLC7A11可有效克服耐药。这些发现为CRPC临床治疗提供了新的联合治疗策略，具有重要的转化医学价值。虽然研究存在临床样本验证不足等局限，但其创新性地将蛋白质泛素化修饰与铁死亡调控联系起来，为肿瘤耐药研究开辟了新视角。