VHL疾病相关透明细胞肾癌假包膜的蛋白质组学特征揭示肿瘤边界区独特的微环境

本研究针对VHL综合征相关透明细胞肾癌(ccRCC)假包膜(PC)的分子特征缺失问题，通过质谱蛋白质组学分析130例FFPE样本，首次揭示PC区富含TGFβ2等ECM重塑蛋白和myoCAF标记物，发现其机械转导特征与肿瘤大小相关，为理解ccRCC侵袭机制提供新视角。

　　

在肾脏肿瘤研究领域，透明细胞肾细胞癌(ccRCC)因其独特的假性包膜(Pseudocapsule, PC)结构长期备受关注。这种在90%病例中出现的纤维性边界，传统上被视为物理屏障，但其分子特征与功能机制始终迷雾重重。尤其对于遗传性VHL综合征患者——这群因VHL基因胚系突变注定罹患多发性ccRCC的特殊人群，其PC是否具有区别于散发病例的生物学特性，更是悬而未决的关键问题。

来自德国弗莱堡大学医学中心(University Medical Center Freiburg, Faculty of Medicine)的Tobias Feilen团队在《Neoplasia》发表的重要研究，通过高深度蛋白质组学技术，首次绘制了VHL相关ccRCC假包膜的分子图谱。研究人员收集34例患者130份石蜡包埋(FFPE)样本，采用自动化SP3前处理结合dia-PASEF质谱技术，实现平均7022种蛋白质/样本的覆盖度，通过半胰蛋白酶肽分析揭示ECM动态重塑过程。

患者队列概述与蛋白质组覆盖

研究纳入12例异时性肿瘤患者，通过主成分分析证实PC样本的过渡性特征：其蛋白质组介于肿瘤与癌旁组织(NAT)之间。特别值得注意的是，胶原蛋白COL1A1和金属蛋白酶MMP14的免疫组化验证显示PC区存在独特的基质沉积模式。

ccRCC假包膜的蛋白质组特征

共鉴定265种PC特异性蛋白，其中1/3属于基质体(matrisome)。关键发现包括：

1. 胶原COL6A1和弹性蛋白ELN显著富集

2. 整合素ITGA11与盘状结构域受体DDR2上调3.8倍

3. 半特异性肽分析显示COL1A1/COL6A3在PC区存在选择性剪切

4. 肌成纤维样CAF标记物FAP和PDGFRB显著升高，而炎性CAF标志物DPP4下降

机械转导与肿瘤大小相关性

当肿瘤直径＞4cm时，PC区呈现：

• 补体成分C3和CD163等免疫相关蛋白上升1.6倍

• 线粒体复合物IV亚基COX7A2下降2.1倍

• 机械敏感蛋白SYNE3和ROCK2持续高表达

肿瘤微环境特征

ccRCC核心区呈现典型VHL缺失表型：

• 糖酵解酶HK2和LDHA上调3.2倍

• 免疫蛋白酶体亚基PSMB8-10升高2.4倍

• 炎症小体传感器IFI16与gasdermin-D共表达

异时性肿瘤的蛋白质组可塑性

6例患者的配对原发/异时性肿瘤显示：

• PBRM1蛋白水平变异系数达68%

• 抗体偶联药物(ADC)靶点CDH6在32%异时性肿瘤中丢失

这项研究突破了传统组织学认知，证实假包膜是富含myoCAF和TGFβ2信号的活性功能单元。特别值得注意的是，MMP7在PC区的逆向调控模式（肿瘤区下降2.1倍，PC区上升1.8倍）提示其可能成为抑制假包膜降解的治疗靶点。对于VHL综合征患者，研究发现异时性肿瘤间存在显著的蛋白质组异质性，这为临床监测策略提供了重要启示：针对多发性ccRCC，需进行个体化的分子分型而非简单沿用初诊治疗方案。

该研究的创新性在于首次将假包膜作为独立功能单元进行系统分析，其建立的PC区基质蛋白数据库将为后续生物标志物开发奠定基础。特别是发现机械应力诱导的ROCK2持续激活现象，为理解肿瘤物理微环境与生化信号的交叉对话提供了新视角。这些发现不仅对VHL综合征患者的临床管理具有直接指导价值，也为散发性ccRCC的侵袭机制研究提供了重要参照。