靶向成纤维细胞活化蛋白的新型PET示踪剂[68Ga]Ga-AAZTA-FAPI-46的临床前评估

本研究针对传统FAP靶向PET示踪剂需高温标记的局限，开发了基于AAZTA螯合剂的[68Ga]Ga-AAZTA-FAPI-46新型示踪剂。通过室温快速标记、稳定性测试及4T1肿瘤模型验证，证实其具有与DOTA-FAPI-46相当的靶向性能（肿瘤SUVmean 1.01±0.12），为FAP靶向诊疗提供了更便捷的分子探针选择。

　　

在精准医疗时代，靶向肿瘤微环境的分子影像技术正成为研究热点。成纤维细胞活化蛋白(Fibroblast Activation Protein, FAP)作为癌症相关成纤维细胞(CAFs)的标志物，在90%的上皮源性肿瘤中过表达，但其靶向探针的开发面临传统DOTA螯合剂需高温标记的技术瓶颈。都灵大学生物技术与转化医学中心的Rebecca Rizzo团队在《EJNMMI Radiopharmacy and Chemistry》发表的研究，通过创新性将AAZTA螯合剂与FAPI-46抑制剂结合，实现了室温条件下高效稳定的⁶⁸Ga标记，为FAP靶向诊疗提供了新工具。

研究团队采用化学合成、放射化学标记、细胞结合实验及4T1乳腺癌小鼠模型等多学科方法。关键步骤包括：1）AAZTA-FAPI-46的酰胺偶联合成；2）pH 3.5条件下室温10分钟完成⁶⁸Ga标记（放射化学产率84.97%）；3）HEK293T-FAP细胞竞争实验验证靶向性；4）4T1荷瘤鼠PET/CT动态显像。

结果部分

放射标记优化：在pH 3.5、5μM前体浓度条件下，15分钟标记效率达98%，显著优于传统DOTA体系（需100°C加热）。

稳定性验证：示踪剂在血清中2小时保留率84%，PBS和EDTA中保持稳定，logD_7.4=-2.48显示良好亲水性。

体外靶向性：竞争实验显示IC₅₀=4.61±0.21 nM，与DOTA-FAPI-46（13.5 nM）相比结合力提升3倍。

体内性能：4T1肿瘤摄取SUV_mean 1.01±0.12（35分钟），160分钟时肿瘤/肌肉比达2.45±0.59，显著高于DOTA版本（1.76±0.53）。阻断实验证实特异性（肿瘤摄取降低87%）。

该研究突破性地证明AAZTA螯合剂可保持FAPI-46的药代动力学特性，同时解决高温标记难题。其室温标记特性为温度敏感型靶向分子（如蛋白类药物）的⁶⁸Ga标记开辟新途径，且AAZTA兼容¹⁷⁷Lu/⁴⁴Sc的特性为后续诊疗一体化研究奠定基础。值得注意的是，在天然表达FAP的4T1模型中取得显著信号（仅用1-2 MBq活度），较转染模型更具临床转化价值。