新型荧光探针Cy5-HwTx-IV：靶向hNav1.7通道的非小细胞肺癌精准成像突破

为解决非小细胞肺癌（NSCLC）缺乏特异性诊断工具的问题，法国巴黎萨克雷大学的研究团队开发了荧光标记肽Cy5-HwTx-IV，靶向过表达于NSCLC的hNav1.7钠通道。研究通过电生理学和共聚焦显微技术证实，该探针可特异性识别转移性H460细胞膜上的hNav1.7，为NSCLC的早期诊断和精准手术导航提供新策略。

　　

肺癌是全球致死率最高的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占病例的85%。现有诊断技术如PET扫描依赖葡萄糖代谢显像，但约16%的早期肿瘤和低代谢腺癌易漏诊。更棘手的是，NSCLC的侵袭转移与电压门控钠通道hNa_v1.7的过表达密切相关，却缺乏靶向该通道的分子影像工具。

法国巴黎萨克雷大学（Université Paris-Saclay）CEA研究所的Romain Baudat团队独辟蹊径，从中国虎纹捕鸟蛛毒液中提取的huwentoxin-IV（HwTx-IV）肽，通过点击化学偶联Cy5荧光团，打造出新型探针Cy5-HwTx-IV。这项发表于《Biochemical Pharmacology》的研究，首次实现hNa_v1.7在NSCLC细胞膜上的纳米级精准定位。

研究团队运用四大关键技术：

1. 固相肽合成与点击化学构建Cy5-HwTx-IV，经HPLC和质谱验证纯度；

2. RT-qPCR检测A549、H460和Beas-2B细胞中hNa_v1.7 mRNA表达；

3. 全细胞膜片钳记录分析毒素对CHO-hNa_v1.7及肺癌细胞钠电流的抑制；

4. 共聚焦显微镜观察探针在细胞膜上的定位，并用WGA-488标记膜结构验证。

【hNa_v1.7的差异表达】

RT-qPCR显示转移性H460细胞的hNa_v1.7 mRNA表达量是正常肺细胞的8.65倍，而非转移性A549仅4.1倍。电生理实验进一步证实，仅H460细胞产生可被100 nM Cy5-HwTx-IV完全阻断的钠电流（-157.9±54.3 pA），提示hNa_v1.7是转移表型的关键效应器。

【探针的精准靶向能力】

共聚焦成像显示，50 nM Cy5-HwTx-IV在H460细胞膜的荧光强度达45.06 a.u.，与阳性对照CHO-hNa_v1.7细胞（43.10 a.u.）相当。预加500 nM未标记HwTx-IV后信号下降87%，证实结合特异性。意外的是，虽A549细胞无功能性钠通道，仍检测到30.86 a.u.的荧光，暗示可能存在截短型hNa_v1.7蛋白。

这项研究的突破性在于：

1. 首次将蜘蛛毒素改造为癌症诊断工具，拓展了动物毒素的医学应用边界；

2. 纳米级亲和力（IC₅₀=20.4 nM）使成像剂量较同类探针降低500倍；

3. 为NSCLC的分子分型提供新依据——hNa_v1.7或可预测转移潜能。

正如讨论所述，未来可开发⁶⁴Cu标记的HwTx-IV用于PET成像，或联合术中荧光导航系统。该策略还可能推广至前列腺癌、甲状腺癌等hNa_v1.7高表达肿瘤，为精准肿瘤学开辟新路径。