抗菌防腐剂对曲妥珠单抗蛋白质折叠稳定性及亚可见颗粒形成的影响研究

本文推荐语：本研究系统评估了苯甲醇（BA）、间甲酚（m-cresol）、苯氧乙醇（PE）和苯扎氯铵（BAC）四种防腐剂对治疗HER2阳性癌症的单克隆抗体（mAb）曲妥珠单抗（trastuzumab）稳定性的影响。通过差示扫描量热法（DSC）、动态光散射（DLS）等技术发现，苯氧乙醇（0.5% v/v）在保持单体含量和抑制颗粒生成方面表现最优，而苯甲醇（ΔTm:-5.39°C）和间甲酚（>100μm可见颗粒）存在显著风险，为多剂量生物制剂（MDVs）的防腐剂选择提供了关键数据。

　　

Highlight

Materials

研究使用的赫赛汀?（Herceptin?，曲妥珠单抗，600 mg/5 mL）购自韩国罗氏公司。苯甲醇、苯酚来自韩国大正化学，甘氨酸和苯扎氯铵购自Sigma-Aldrich，间甲酚（98.0%）由韩国三春化学提供。

Folding stability of trastuzumab in the presence of preservatives

差示扫描量热法（DSC）显示，2 mg/mL曲妥珠单抗在70.34°C（CH₂域解折叠）和81.89°C（Fab/CH₃域）处出现特征峰，与文献一致。苯甲醇（1.0% v/v）使热稳定性显著降低（ΔT_m:-5.39°C），而苯氧乙醇（0.5% v/v）几乎无影响。

Conclusion

苯扎氯铵（0.01%-0.04% w/v）表现出浓度依赖性矛盾行为：低浓度促进亚可见聚集，高浓度通过胶束形成稳定结构（但引发不可逆β-折叠转变）。间甲酚在72小时内触发>100μm可见颗粒，而苯氧乙醇在抗菌效力与蛋白质稳定性间达到最佳平衡，是曲妥珠单抗多剂量制剂的理想选择。