橙皮苷通过VEGFA-PI3K/AKT通路改善非酒精性脂肪肝的肝细胞周期紊乱与程序性死亡

本研究揭示了柑橘类黄酮化合物橙皮苷（HDN）通过激活VEGFA-PI3K/AKT信号通路，显著改善高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝（NAFLD）模型中的脂质代谢紊乱，并首次阐明其通过调控细胞周期、抑制细胞凋亡（apoptosis）和坏死性凋亡（necroptosis）发挥肝保护作用的分子机制，为天然产物治疗代谢性肝病提供了新靶点。

　　

Highlight

橙皮苷通过VEGFA-PI3K/AKT通路改善非酒精性脂肪肝小鼠的肝细胞周期紊乱、凋亡和坏死性凋亡

Abstract

背景与目的

非酒精性脂肪肝（NAFLD）全球发病率逐年攀升，但缺乏安全特效药物。橙皮苷（HDN）作为柑橘来源的黄酮类化合物，具有抗氧化特性，研究表明其对NAFLD具有改善作用。

方法

本研究通过高脂饮食（HFD）诱导小鼠和棕榈油酸（PO）刺激AML12细胞分别构建体内外高脂模型，综合运用病理学检测、RNA测序、Western Blot、免疫荧光（IF）、流式细胞术、吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色、分子对接、免疫共沉淀（Co-IP）和油红O染色等技术，结合siRNA基因沉默和740Y-P药理干预，系统解析HDN的肝保护机制。

结果

生化分析显示HDN显著减少NAFLD脂质沉积。生物信息学锁定血管内皮生长因子A（VEGFA）为关键介质。分子实验证实HDN通过激活VEGFA-PI3K/AKT通路，有效缓解细胞周期失调、凋亡和坏死性凋亡。

结论

HDN通过重建VEGFA-PI3K/AKT信号轴，稳定细胞周期并抑制程序性死亡，为NAFLD治疗提供新策略。

Introduction

NAFLD作为全球患病率达38%的慢性肝病，可从单纯性脂肪变进展为非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、肝纤维化甚至肝癌。目前FDA和EMA均未批准特效药物。研究首次发现VEGFA糖蛋白通过调控PI3K/AKT等通路影响代谢稳态，而柑橘黄酮HDN（C₂₈H₃₄O₁₅）前期被证实可通过SIRT1/PGC1α通路缓解NAFLD，但其深层机制仍有空白。

Section snippets

化学试剂

HDN（纯度>98%）购自上海源叶生物，高脂饲料由北京晓鼠优泰生物技术有限公司提供。

HDN减轻HFD诱导的小鼠肝脏脂肪堆积和损伤

H&E染色显示HDN组肝脏结构完整，而HFD组出现典型脂肪空泡和炎性浸润（图1B）。血清学检测证实HDN显著降低ALT/AST水平（p<0.01），油红O染色显示肝细胞脂滴减少50%以上。

讨论

本研究首次阐明HDN通过三重作用机制对抗NAFLD：① 通过上调Cyclin D1/CDK4修复细胞周期；② 抑制Caspase-3/Bax通路阻断凋亡；③ 降低RIPK1/MLKL表达遏制坏死性凋亡。分子对接显示HDN与VEGFA的Lys⁴⁸和Glu⁶⁴残点形成稳定氢键（结合能-8.2 kcal/mol）。

Conclusions

HDN通过VEGFA-PI3K/AKT信号网络，多靶点改善NAFLD病理进程（图8），为天然产物治疗代谢性疾病提供理论依据。