CD8 T细胞功能亢进与晚期肝病小鼠模型中肿瘤控制减弱的机制研究

（编辑推荐）本研究通过四氯化碳（CCl4）诱导的肝纤维化模型和高脂饮食（HFD）模型，揭示了晚期肝病中系统性CD8 T细胞功能亢进（IFN-γ/GrB表达升高）与抗肿瘤免疫应答受损的关联，为肝病相关免疫功能障碍及肝癌免疫治疗抵抗提供了新见解。

　　

摘要

研究团队通过小鼠模型揭示了晚期肝病中CD8 T细胞的系统性功能亢进现象。在慢性丙型肝炎病毒（HCV）感染和代谢相关脂肪性肝病（MASLD）患者中，CD8 T细胞表现出干扰素γ（IFN-γ）和颗粒酶B（GrB）的过度分泌，但伴随抗肿瘤能力下降。本研究通过四氯化碳（CCl₄）诱导的肝纤维化模型和高脂饮食（HFD）模型，验证了这一现象，并发现其与免疫治疗响应延迟相关。

1 引言

全球约20%人口受慢性肝病影响，肝纤维化导致免疫功能障碍，但机制尚不明确。此前研究发现HCV感染伴晚期纤维化患者中，CD8 T细胞存在长期功能亢进，但病毒与纤维化的独立作用未阐明。本研究利用CCl₄诱导的小鼠肝纤维化模型（模拟人类HCV病理）和HFD诱导的脂肪肝模型，探究CD8 T细胞功能与肝病进展的关系。

2 结果

2.1 CCl₄诱导的肝纤维化模拟人类HCV病理

小鼠经12周CCl₄暴露后出现桥接纤维化（Metavir评分F3-4），伴随AST/ALT比值升高（1.737±0.352），与人类肝硬化特征一致。

2.2 CD8 T细胞功能亢进的表型特征

流式细胞术显示，CCl₄组小鼠外周血CD8 T细胞经CD3/CD28刺激后，IFN-γ⁺和GrB⁺细胞比例显著增加（p≤0.01），且多功能细胞（GrB⁺IFN-γ⁺CD107a⁺）增多。功能亢进在T_E/EM（效应/记忆）亚群中尤为显著，但PD-1表达未改变。

2.3 纤维化消退后功能亢进持续存在

停止CCl₄处理4周后，肝纤维化减轻至F1-2，但CD8 T细胞的GrB和IFN-γ高表达仍持续（雌性小鼠部分恢复），提示功能异常与组织修复不同步。

2.4 肿瘤控制与免疫治疗响应受损

MC38结肠癌模型显示，CCl₄处理组小鼠肿瘤生长加速（p≤0.01），且抗PD-1/CTLA-4联合治疗响应延迟。纤维化消退后，仅50%小鼠恢复肿瘤控制能力。

2.5 HFD模型中CD8 T细胞功能亢进

45% HFD喂养14周的小鼠出现肝脂肪变性和轻度炎症（NAS评分升高），其CD8 T细胞同样表现IFN-γ/GrB高分泌，证实功能亢进不依赖纤维化程度。

3 讨论

研究首次在非病毒性肝病模型中证实CD8 T细胞功能亢进的普遍性，其机制可能与慢性炎症导致的表观遗传修饰相关。该现象解释了肝硬化患者免疫监视功能低下和肝癌免疫治疗疗效差的原因。HFD模型进一步提示代谢紊乱同样驱动免疫失调，为MASLD相关肝癌防治提供新靶点。

4 数据局限性

需进一步探索功能亢进的分子机制（如Hedgehog通路）及性别差异（雌性小鼠恢复更显著）。

5 材料与方法

实验采用C57BL/6小鼠，通过组织染色、流式细胞术和多因子检测进行分析。统计采用ANOVA和t检验，数据以均值±标准差呈现。