综述：揭示细胞外囊泡的异质性：从群体到单颗粒水平

这篇综述系统梳理了细胞外囊泡（EVs）的多维度异质性特征，从群体水平的生物发生来源、粒径分布、表面蛋白/聚糖链/脂质分析，到单颗粒检测技术（如SRM、AFM、NTA等），并探讨了点击化学、Olink蛋白质组学等新兴技术在解析EV亚群生物学机制中的应用前景。

　　

ABSTRACT

细胞外囊泡（EVs）作为细胞分泌的脂质双层膜结构，承载着蛋白质、核酸、脂质和代谢物等生物分子，在细胞间通讯中扮演关键角色。其异质性体现在物理特性和分子组成的多维差异：从不同生物发生途径（如外泌体、微囊泡）起源的EV亚群，到80-1000 nm的粒径连续分布，再到表面标志物（如CD63⁺/CD81⁺）的差异化表达。

群体水平分析技术虽能获得EV分子谱的平均值，但会掩盖功能相关的亚群特征。例如，肿瘤来源EVs可能同时携带促血管生成因子（如VEGF）和免疫抑制蛋白（如PD-L1），这些分子的共定位信息在批量检测中极易丢失。

单颗粒解析技术突破

超分辨显微镜（SRM）可突破衍射极限，观察到单个EV表面蛋白的纳米级空间排列；原子力显微镜（AFM）能同步获取颗粒机械性能与拓扑结构；纳米颗粒追踪分析（NTA）通过布朗运动解析亚群粒径分布；而表面增强拉曼光谱（SERS）则实现了单颗粒指纹图谱的无标记获取。

新兴技术如邻近条形码（PBA）通过DNA编码实现单EV多组学分析，Olink平台可检测低至fg级的微量蛋白，分子印迹聚合物则能特异性捕获特定表面糖基化模式的稀有EV亚群。这些技术进步为揭示EV异质性在肿瘤转移、免疫逃逸等病理过程中的精确调控机制提供了全新工具。

Conflicts of Interest

作者声明无利益冲突。