脂质体靶向递送外泌体源miR-185-5p抑制剂通过调控凋亡与铜死亡缓解扩张型心肌病病理进程

这篇研究创新性地构建了心脏靶向肽修饰的脂质体（Lipo@miR-185-5p inhibitor），通过抑制外泌体源miR-185-5p同时干预凋亡（apoptosis）和铜死亡（cuproptosis）通路，在阿霉素（DOX）诱导的扩张型心肌病（DCM）模型中显著改善左室射血分数（LVEF↑27.3%）和心肌纤维化（↓36.5%）。该靶向递送系统兼具外泌体天然归巢能力和脂质体稳定载药特性，为心血管疾病基因治疗提供新范式。

　　

脂质体靶向递送系统的构建与表征

研究采用薄膜水化联合膜挤出法制备负载miR-185-5p抑制剂的阳离子脂质体（Lipo@miR-185-5p inhibitor），透射电镜显示其呈规则球形（直径约100nm），zeta电位29.7mV。该体系具有超高包封率（98.0±1.2%）和双相释放特性（8小时突释+48小时缓释），且PBS中48小时内粒径稳定在172.35±0.8nm。心脏靶向肽APWHLSSQYSRT的修饰使CY5.5标记脂质体在心肌的荧光信号较非靶向组增强3.2倍，而肝/肾分布显著降低。

多维度验证治疗机制

在DOX诱导的DCM模型中，靶向治疗组展现出多重保护效应：

1. 功能改善：超声心动图显示左室射血分数（EF）从35.6±4.2%提升至58.3±3.1%（P<0.01），心脏输出量（CO）从6.2±0.9 mL/min恢复至10.8±1.1 mL/min；

2. 分子调控：Western blot证实Bcl-2表达上调而Bax/cleaved Caspase-3下调，同时铜死亡关键蛋白DLAT、FDX1表达降低50%以上；

3. 病理缓解：Masson染色显示心肌胶原沉积减少36.5%，心肌铜离子浓度从25.04±1.73 μmol/L降至10.06±1.48 μmol/L。

创新性治疗策略

该研究首次提出"外泌体-脂质体杂化递送"概念：

• 源头创新：选用血浆外泌体来源的miR-185-5p抑制剂，保留天然miRNA调控网络；

• 双通路干预：同步抑制凋亡（TUNEL阳性细胞减少42.6%）和铜死亡（γH2AX标记DNA损伤降低51.8%）；

• 精准递送：靶向肽介导的主动靶向使心肌药物蓄积量提升3倍，且血清肝肾功能指标（ALT/AST/BUN）无异常。

临床转化前景

相较于传统ACEI/β受体阻滞剂，该策略在DOX心肌病模型中使生存期延长2.3倍。其核心优势在于：

1. 突破现有疗法仅缓解症状的局限，直击DCM核心病理环节；

2. 纳米载体可扩展搭载其他miRNA或siRNA，形成"心血管核酸药物平台"；

3. 采用的DOTAP/DOPE脂质成分已获FDA批准，具良好转化基础。

未解问题与展望

研究遗留两个关键科学问题：铜死亡与凋亡的crosstalk机制尚未阐明；长期给药可能产生的免疫原性需评估。未来可通过类器官模型和NHP（非人灵长类）实验推进临床前研究。