CLEC3B通过诱导铁死亡增强三阴性乳腺癌顺铂化疗敏感性的机制研究

本研究针对三阴性乳腺癌(TNBC)患者顺铂(CDDP)化疗耐药问题，揭示了C型凝集素结构域家族3成员B(CLEC3B)通过调控SLC39A8/SLC39A14介导的铁死亡(ferroptosis)通路增强化疗敏感性的新机制。研究人员发现CLEC3B在复发TNBC组织中显著下调，其过表达可通过促进铁离子(Fe2+)积累和脂质过氧化(MDA)增强CDDP杀伤效果，为克服TNBC化疗耐药提供了新靶点。

　　

三阴性乳腺癌(TNBC)作为乳腺癌中最具侵袭性的亚型，缺乏雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER2)的表达，导致治疗选择有限。顺铂(CDDP)等DNA损伤类药物虽是TNBC化疗主力，但耐药性成为临床重大挑战。当肿瘤细胞对传统凋亡途径产生抵抗时，铁死亡——一种铁依赖性脂质过氧化驱动的细胞死亡方式，为逆转耐药提供了新思路。

深圳市龙华区中心医院的研究团队在《European Journal of Medical Research》发表重要成果，首次揭示分泌型蛋白CLEC3B通过激活铁死亡通路克服TNBC耐药的分子机制。研究人员采用TCGA数据库分析、组织样本验证（含8例复发/非复发TNBC配对样本）及多维度功能实验，结合铁死亡特异性抑制剂Ferrostatin-1干预，系统阐明了CLEC3B-SLC39A8/14轴在化疗敏感性调控中的核心作用。

关键技术方法包括：通过shRNA构建CLEC3B/SLC39A8/SLC39A14稳定敲低细胞系；MTT法和克隆形成实验检测CDDP半数抑制浓度(IC₅₀)；TUNEL染色量化细胞凋亡；铁离子荧光探针(Fe²⁺ Fluorometric Assay)和丙二醛(MDA)检测评估铁死亡特征；免疫共沉淀(Co-IP)验证蛋白互作。

主要研究结果：

1. CLEC3B与TNBC预后相关

   TCGA数据分析显示CLEC3B高表达TNBC患者总生存期延长（化疗组风险比HR=0.62），复发患者组织CLEC3B mRNA水平降低2.3倍（p<0.001）。

2. CLEC3B增强CDDP敏感性

   在HCC1937细胞（天然低表达CLEC3B）中过表达使CDDP IC₅₀从12.4μM降至6.8μM（p<0.05），而Hs578T细胞（高表达）敲低后IC₅₀提升至18.9μM。TUNEL实验显示CLEC3B使CDDP诱导的凋亡率提升2.1倍。

3. 铁死亡是关键作用机制

   特异性抑制剂Ferrostatin-1可完全阻断CLEC3B的促化疗敏感效应，而凋亡抑制剂Z-VAD-FMK无此作用。CLEC3B过表达使细胞内Fe²⁺浓度升高1.8倍（p<0.05），MDA水平增加2.4倍。

4. SLC39A8/14是核心效应分子

   Co-IP证实CLEC3B与锌铁转运蛋白SLC39A8/ZIP8、SLC39A14/ZIP14直接结合。双敲除SLC39A8/14可逆转CLEC3B过表达导致的Fe²⁺蓄积（下降63%）和CDDP敏感性增强（IC₅₀回升至11.2μM）。

这项研究首次建立CLEC3B-SLC39A8/14-铁死亡轴在TNBC化疗耐药中的调控网络，为临床预测CDDP疗效提供了新型生物标志物（CLEC3B表达水平）。特别值得注意的是，SLC39家族转运蛋白作为铁死亡"开关"的发现，为开发靶向金属离子代谢的联合化疗策略开辟了新途径。作者在讨论中指出，该机制可能普遍适用于其他依赖铁死亡的肿瘤类型，但需进一步验证CLEC3B在不同肿瘤微环境中的调控差异。研究局限性在于尚未阐明CLEC3B如何精确调控SLC39A8/14的转运活性，这将是未来深入探索的方向。