片仔癀通过多靶点调控PI3K/Akt通路诱导细胞周期阻滞的抗肝癌作用：从计算预测到实验验证

推荐：本研究针对肝细胞癌(HCC)治疗中靶向药物耐药性和副作用问题，通过整合网络药理学、分子对接和体外实验，系统揭示了片仔癀(PTH)通过调控PI3K/Akt等多条信号通路关键靶点(如MMP9、MET等)，抑制肝癌细胞增殖并诱导凋亡的作用机制，为中药复方抗肿瘤研究提供了"多成分-多靶点-多通路"协同作用的范例。

　　

肝细胞癌(HCC)作为全球高致死率的恶性肿瘤，现有治疗手段面临严峻挑战。尽管靶向药物索拉非尼等为晚期患者带来希望，但耐药性和高血压等副作用导致临床疗效受限。传统中药复方因其多靶点协同作用和低毒性特点，在肿瘤辅助治疗领域展现出独特优势。其中，经典中成药片仔癀(PTH)由三七(85%)、蛇胆(7%)、牛黄(5%)和麝香(3%)组成，临床研究显示其对肝癌等多种癌症具有显著疗效，但其作用机制尚未系统阐明。

浙江省人民医院临床药学中心的研究团队在《Pharmacological Research - Modern Chinese Medicine》发表最新成果，通过整合计算预测与实验验证，首次揭示PTH通过多靶点调控PI3K/Akt信号通路发挥抗HCC作用的分子机制。研究采用网络药理学筛选79种活性成分，结合ADMETlab 2.0评估药物代谢特性；运用SwissTargetPrediction等四类靶点预测工具鉴定423个潜在靶点；通过STRING数据库构建蛋白互作网络，采用七种算法识别10个关键靶点；利用分子对接验证活性成分与靶标结合能力；最后通过CCK-8、流式细胞术和Western blot等实验验证PTH对HepG2和Huh7细胞的抑制作用。

研究结果部分显示：

3.1 活性成分筛选中，从506个候选化合物中筛选出79个符合Lipinski五规则的活性成分，结构分析显示类固醇碳骨架是其主要特征。

3.2 治疗靶点分析发现47个HCC相关靶点，网络拓扑分析确定10个关键化合物，KEGG富集显示PI3K-Akt、MAPK等通路显著富集。

3.3 PPI网络分析鉴定出MMP9、MAP2K1等10个枢纽基因，生存分析显示MMP9和SLC2A1高表达与患者预后显著相关。

3.4 分子对接证实胆甾醇阿魏酸酯(MOL_57)等成分与MET(-8.726 kcal/mol)等靶点的结合力优于FDA批准药物卡博替尼(-6.354 kcal/mol)。

3.5 体外实验验证PTH以剂量依赖性方式抑制细胞增殖(1.2 mg/mL时HepG2抑制率最高)，并通过抑制p-AKT表达诱导细胞凋亡。

该研究创新性地构建了"草药-活性成分-靶点-通路-疾病"多维网络，阐明PTH通过协同调控PI3K/Akt等关键通路中MMP9、MET等多个靶点，实现抑制肝癌细胞恶性增殖的作用模式。特别值得注意的是，多个PTH活性成分与靶蛋白的结合能力优于现有临床药物，这为开发新型多靶点抗HCC药物提供了理论依据。尽管研究尚未在动物模型和耐药细胞系中验证，但其整合计算预测与实验验证的研究策略，为中药复方作用机制研究提供了范式。该成果不仅深化了对PTH抗肿瘤机制的认识，也为临床优化肝癌综合治疗方案提供了科学依据。