新型内皮素受体拮抗剂HJP 272抑制肿瘤细胞迁移与侵袭的机制研究及其在癌症转移治疗中的潜在应用

本研究针对内皮素(ET)轴在肿瘤转移中的关键作用，首次探究了新型ETAR拮抗剂HJP 272对三阴性乳腺癌(MDA-MB-231)和非小细胞肺癌(A549)细胞迁移、侵袭及克隆形成能力的抑制作用。通过RNA-seq和Western blot揭示其通过调控CDK-Rb-E2F轴、IL-17信号通路等分子机制，为癌症转移治疗提供了新策略。

　　

癌症转移是临床治疗失败的主要原因，而内皮素-1(ET-1)作为最强大的血管收缩肽，近年被发现通过ET_A受体(ET_AR)激活多条促癌通路。从卵巢癌到三阴性乳腺癌，ET-1过度表达与肿瘤侵袭、血管生成和耐药性密切相关。然而，现有ET_AR拮抗剂如安立生坦(Ambrisentan)在临床试验中抗肿瘤效果有限，亟需开发新型靶向药物。

美国圣约翰大学(St. John’s University)的研究团队首次将其自主研发的1,3,6-三取代-4-氧代-1,4-二氢喹啉-2-羧酸类似物HJP 272应用于癌症研究。这种选择性ET_AR非竞争性拮抗剂此前已证实对肺纤维化和早产有疗效，最新发表于《Translational Oncology》的研究则揭示：该化合物虽不直接影响癌细胞活力，但能显著抑制转移关键步骤——使MDA-MB-231细胞的迁移能力降低3.53倍，并发现其对不同癌症类型存在差异调控机制。

研究采用MTT法检测细胞活力、Transwell实验评估迁移侵袭、克隆形成实验分析增殖潜力，结合RNA-seq转录组测序和Western blot验证关键蛋白表达。特别运用3D肿瘤球体模型模拟体内微环境，通过活死细胞双染评价长期药效。

结果部分显示：

1. 细胞毒性：HJP 272在100 μM浓度下对两种细胞均无毒性，但NCI 60筛查证实其特异性抗转移特性。

2. 迁移侵袭抑制：Boyden chamber实验显示50 μM处理24小时即可使A549细胞侵袭减少61%，MDA-MB-231细胞迁移下降更显著。

3. 克隆形成阻断：100 μM处理使MDA-MB-231集落形成减少3.53倍，Western blot显示CDK6和MAPK蛋白表达下调。

4. 促凋亡效应：流式细胞术检测到A549细胞凋亡率提升至44.13%，Caspase-3/7活性增加1.5倍。

5. 转录组调控：RNA-seq揭示A549细胞中CycE、Cdc6等细胞周期基因下调，而MDA-MB-231细胞中IL-6、MMP9等转移相关基因受抑制。

6. 3D模型验证：15天处理使乳腺肿瘤球体直径缩小35.15%，活细胞荧光标记显示明显死亡信号。

讨论部分强调：该研究首次阐明HJP 272通过双重机制发挥抗转移作用——在肺癌细胞主要干预CDK-Rb-E2F轴阻滞细胞周期，在乳腺癌细胞则靶向IL-17/MMP9通路抑制细胞外基质降解。这种癌症类型特异性与ET_AR下游信号异质性相关，为精准用药提供依据。尽管缺乏体内实验，但3D模型已证实其长期抑瘤效果，结合前期肺纤维化研究中的良好安全性，HJP 272有望成为首个兼具抗纤维化和抗转移活性的ET_AR拮抗剂。未来研究将探索其与PD-1抑制剂等联合疗法的协同效应。