CAIX靶向免疫疗法通过下调PD-L1实现间接免疫检查点阻断：肾透明细胞癌治疗新策略

推荐：研究人员针对肾透明细胞癌(ccRCC)中PD-L1过表达导致的免疫抑制微环境，通过靶向碳酸酐酶IX(CAIX)的单克隆抗体(mAbs)和CAR T细胞疗法，发现CAIX抑制可显著下调PD-L1表达，并揭示PI3K/Akt通路参与调控。该研究为ccRCC免疫治疗提供了双重作用机制的新策略。

　　

在肿瘤治疗领域，免疫检查点阻断疗法虽取得突破性进展，但肾透明细胞癌(ccRCC)患者中约24%存在PD-L1过表达，导致53%的死亡风险增加。更棘手的是，现有PD-1/PD-L1抑制剂常伴随严重免疫相关不良反应。与此同时，碳酸酐酶IX(CAIX)作为ccRCC的特征性标志物，在94-97%病例中高表达，但其与PD-L1的调控关系仍是未解之谜。

圣保罗联邦大学血液肿瘤学项目组的研究人员通过创新性实验设计，揭示了CAIX靶向治疗可间接阻断免疫检查点的双重机制。这项发表在《European Journal of Medicinal Chemistry》的研究，不仅为ccRCC提供了新的治疗靶点，更开辟了通过单一靶点实现双重疗效的新思路。

研究团队运用多组学联用策略：通过癌症细胞系百科全书(CCLE)的RNA-seq数据开展生物信息学分析；采用流式细胞分选技术追踪CAIX与PD-L1表达动态；利用两种抗CAIX单克隆抗体（克隆G36和GT12）进行体外干预；构建含4-1BB共刺激域的CAIX特异性CAR T细胞进行体内验证；结合Western blot解析PI3K/Akt信号通路作用。

结果部分显示：

3.1 生物信息学分析发现CAIX与PD-L1表达呈显著正相关

通过9种ccRCC细胞系RNA-seq数据，首次证实CAIX与PD-L1 mRNA表达存在Pearson相关系数0.68的线性关联。

3.2 CAIX阴性选择导致PD-L1表达消失

SKRC52细胞分选实验揭示：初始CAIX阴性/PD-L1阳性亚群在培养两周后自发转变为双阴性，而CAIX阳性亚群维持稳定，暗示CAIX缺失可能触发PD-L1降解机制。

3.3 抗CAIX单抗可剂量依赖性下调PD-L1

20μg/mL G36单抗处理使SKRC52细胞PD-L1阳性率降低55%，荧光强度下降80%。值得注意的是，这种调控与细胞存活率无关，且GT12克隆在更低剂量（5μg/mL）即显现相似效果。

3.4 PI3K/Akt通路参与PD-L1调控

Western blot显示抗CAIX处理显著降低PI3K表达和Akt Thr308磷酸化水平，特别是在VHL基因突变的SKRC52细胞中，提示HIF-mTOR轴可能参与此调控网络。

3.5 CAR T疗法实现双重免疫治疗效应

体内实验证实，CAIX靶向CAR T细胞不仅直接杀伤肿瘤，还使PD-L1表达降低50%，CD3⁺T细胞浸润增加，颗粒酶B表达升高，且耗竭标志物（CTLA-4/TIM-3/PD-1/CD39）同步下降。

这项研究突破性地揭示了CAIX-PD-L1调控轴的存在：CAIX通过PI3K/Akt/mTOR信号通路维持PD-L1表达，其抑制可产生"一石二鸟"效应——既直接杀伤肿瘤细胞，又解除免疫抑制微环境。特别值得注意的是，VHL基因突变可能增强这种调控效应，为个性化治疗提供分子标志物。从转化医学角度看，该发现使CAIX靶向治疗具有双重临床价值：对于PD-L1阳性患者，可避免单独使用免疫检查点抑制剂的毒副作用；对于PD-L1阴性患者，则可能预防其免疫抑制表型转化。研究提出的CAIX-CAR T联合治疗方案，已在动物模型中显示30%的肿瘤减负效果，为推进临床实验奠定了坚实基础。