喹唑啉衍生物QNZ通过抑制Th1和Th17细胞缓解实验性自身免疫性脑脊髓炎

本文推荐：喹唑啉衍生物QNZ作为高选择性NF-κB抑制剂，通过调控CD4+T细胞分化（抑制Th1/Th17/Th17.1亚群）和细胞因子分泌（如IFN-γ/IL-17），显著减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型的神经炎症和脱髓鞘病变，为多发性硬化症（MS）治疗提供新策略。

　　

引言

多发性硬化症（MS）是一种以中枢神经系统（CNS）脱髓鞘为特征的自身免疫性疾病，其中髓鞘特异性CD4⁺T细胞的异常激活和分化（尤其是Th1和Th17亚群）是核心病理机制。实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）作为MS的经典动物模型，模拟了T细胞介导的神经炎症过程。NF-κB信号通路在Th1/Th17分化中起关键作用，而喹唑啉衍生物QNZ作为NF-κB转录激活的高选择性抑制剂，此前在肿瘤和骨关节炎中展现抗炎潜力，但其对MS/EAE中CD4⁺T细胞的调控机制尚不明确。

材料与方法

研究采用C57BL/6雌性小鼠构建MOG_35-55肽诱导的EAE模型，腹腔注射QNZ（0.2 mg/kg，每2天1次）进行干预。通过流式细胞术分析脾脏和淋巴结中CD4⁺T细胞亚群（Th1/Th17/Th17.1/Treg），ELISA检测血清细胞因子（IFN-γ/IL-17/IL-12/IL-10），qPCR评估转录因子（T-bet/ROR-γt/Foxp3）表达，并结合H&E和LFB染色评估脊髓炎症浸润及脱髓鞘程度。体外实验通过OT-II小鼠CD4⁺T细胞与骨髓来源树突状细胞（BMDCs）共培养体系，验证QNZ对抗原特异性T细胞激活和分化的影响。

结果

1. 抑制T细胞激活与增殖：QNZ显著降低OT-II CD4⁺T细胞的CFSE稀释率和激活标志物CD69/CD25表达，且呈剂量依赖性。

2. 调控Th亚群分化：QNZ减少Th1（CD4⁺IFN-γ⁺）、Th17（CD4⁺IL-17A⁺）及双阳性Th17.1细胞比例，同时下调T-bet和ROR-γt mRNA水平，但对Treg无明显影响。

3. 缓解EAE病理进展：QNZ治疗组小鼠体重下降减缓，临床评分降低，脾脏/淋巴结肿大减轻，脊髓炎症浸润和脱髓鞘面积显著减少。

4. 减少CNS免疫浸润：免疫荧光显示QNZ组脊髓中Th1/Th17细胞浸润减少，血清IFN-γ和IL-17水平下降，而IL-10无显著变化。

讨论

QNZ通过抑制NF-κB通路，阻断IL-12等促炎因子产生，从而削弱Th1/Th17分化及Th17.1细胞的致病性。值得注意的是，Th17.1细胞因其更强的血脑屏障（BBB）穿透能力和对Treg抵抗性，在MS发病中可能比Th1/Th17更具破坏性。此外，QNZ对Treg无显著调控，提示其疗效主要源于直接抑制致病性T细胞而非增强免疫调节功能。

局限与展望

本研究聚焦CD4⁺T细胞，未来需通过单细胞测序等技术探究QNZ对其他免疫细胞（如B细胞、小胶质细胞）的影响。此外，Th9/Th22等新兴T细胞亚群在MS中的作用也值得探索。

结论

喹唑啉衍生物QNZ通过靶向NF-κB通路，有效抑制致病性CD4⁺T细胞极化，减轻EAE神经炎症和脱髓鞘损伤，为MS治疗提供了潜在的小分子候选药物。