重组腺相关病毒血清型9(AAV9)生产优化策略及其在基因治疗中的应用突破

为解决基因治疗和动物模型构建中腺相关病毒(AAV)载体滴度过低的关键问题，研究人员通过优化双质粒转染系统和培养基组成，成功将AAV9产量提升四个数量级，最终获得2.5×1012 vg/mL的高滴度病毒，为基因编辑工具开发提供了重要技术支撑。

　　

基于腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)的载体已成为基因组编辑的利器，但在实验室动物转基因或人类疾病基因治疗应用中，高病毒滴度仍是关键瓶颈。针对AAV血清型9(AAV9)的生产工艺优化研究取得突破性进展：通过精简传统三质粒系统为双质粒转染方案，将目的基因载体与复制/衣壳蛋白表达元件合理分配，使最终病毒滴度提升4倍；进一步优化目的基因质粒与辅助质粒的摩尔比，实现滴度翻倍增长。最具革命性的发现来自培养基组分优化——在DMEM-F12基础培养基中补充胎牛血清后，AAV9产量惊人地提高了约1000倍。这些系统性优化使贴壁培养的HEK293T细胞最终产出达到2.5×10¹² vg/mL的行业领先水平，为大规模基因治疗制剂生产奠定了关键技术基础。