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马铃薯PVX抗性育种中Rx1/Rx2基因的SNP精准分型:基于四引物ARMS-PCR技术的双基因检测体系
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月08日 来源:American Journal of Potato Research 1.8
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为解决马铃薯病毒X(PVX)抗性育种中Rx1/Rx2基因分型难题,研究人员开发了靶向LRR区域SNP位点(G2515C和C2445G)的四引物ARMS-PCR标记。该技术成功对50个四倍体品种进行分型,检出16个Rx1杂合体、5个Rx2杂合体,与表型数据高度吻合。该体系首次实现T-ARMS-PCR双基因检测,为PVX抗性品种选育提供高效分子工具。
野生马铃薯中的Rx1和Rx2基因能赋予植株对马铃薯病毒X(Potato virus X, PVX)的极端抗性。研究团队创新性地采用四引物扩增受阻突变体系PCR(Tetra-primer ARMS-PCR)技术,针对这两个基因的LRR(富亮氨酸重复)区域关键SNP位点——Rx1的G2515C突变和Rx2的C2445G突变,开发出高效分型标记。
在50个四倍体栽培品种的检测中,该技术精准鉴定出16个Rx1杂合体、5个Rx2杂合体以及29个纯合感病品种,分型结果与病毒接种表型完全匹配。特别值得注意的是,通过人工配制DNA混合样本验证,该体系对纯合抗性基因型的检测灵敏度达到理论预期,尽管实际检测中未发现纯合抗性品种。
相较于传统分子标记,这种双基因同步检测的T-ARMS-PCR体系展现出三大优势:更高的通量性、更优的特异性以及更低的成本。该技术突破为马铃薯抗PVX育种提供了强有力的分子育种工具,将显著加速抗病品种选育进程。
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