综述：头颈癌液体活检的最新进展：跨生物流体、分析物和分子特征的研究

这篇综述系统阐述了液体活检（Liquid Biopsy）在头颈癌（HNC）中的临床应用，重点探讨了血液、唾液和淋巴液等生物流体中的循环肿瘤DNA（ctDNA）、外泌体（EVs）和循环肿瘤细胞（CTCs）等分析物，以及EBV/HPV病毒DNA、甲基化标志物和体细胞突变等分子特征。文章为早期诊断、预后评估和分子残留病灶（MRD）监测提供了技术路线图，并强调了多模态检测标准化的重要性。

　　

头颈癌液体活检的临床价值

头颈癌（HNC）尤其是头颈鳞癌（HNSCC）因解剖位置特殊，传统组织活检存在局限性。液体活检通过分析血液、唾液等生物流体中的肿瘤衍生标志物，为早期诊断和治疗监测提供了非侵入性解决方案。

生物流体与分析物

血液：血浆是ctDNA和EBV/HPV病毒DNA检测的主要来源，其半衰期仅约6小时，片段化特征明显。唾液直接接触口腔肿瘤病灶，对口腔鳞癌（OSCC）检测灵敏度高达91%，但易受正常上皮细胞干扰。淋巴液作为新兴来源，术后引流液中的ctDNA富集程度与淋巴结分期相关。

关键分析物：

1. ctDNA：反映肿瘤突变谱，如TP53、PIK3CA等驱动基因变异。

2. 病毒DNA：EBV-DNA在鼻咽癌（NPC）血浆检测中灵敏度达97%，HPV-DNA通过NGS全基因组测序可将口咽癌（OPSCC）检出率提升至99%。

3. 甲基化标志物：如p16^INK4a、MGMT等基因启动子超甲基化，通过MeDIP-seq技术可实现91%的复发预测准确率。

4. EVs：携带PD-L1等免疫检查点分子，与肿瘤免疫逃逸相关。

病毒相关HNC的检测突破

EBV驱动型鼻咽癌：

• 筛查：血浆EBV-DNA定量PCR联合甲基化分析，阳性预测值（PPV）提升至35.1%。

• 预后：治疗后EBV-DNA持续阳性者5年生存率降低3.58倍（HR=3.58）。

HPV相关口咽癌：

• 动态监测：治疗4周内HPV-DNA清除预示良好预后，ddPCR检测灵敏度达89%。

• 双源检测：唾液与血浆联合检测使灵敏度增至96%，复发预警可提前122天。

非病毒HNC的多组学策略

突变谱分析：Wang等采用多源液体活检（血浆+唾液）检测TP53等基因突变，将OSCC灵敏度推至100%。甲基化组学：Burgener团队通过cfMeDIP-seq发现941个超甲基化区域，独立预测复发风险。CTCs：EpCAM阳性CTC≥1个/7.5mL血液时，患者无进展生存期显著缩短。

挑战与未来方向

标准化瓶颈：唾液采集方法差异导致数据可比性下降，需开发兼具细胞稳定和微生物抑制的保存液。临床转化：NRG-HN001等试验正在验证EBV-DNA指导的辅助治疗策略。成本效益：测序成本下降使NGS逐步普及，但肿瘤个体化Panel（如RaDaR）仍面临报销壁垒。

液体活检正重塑头颈癌诊疗范式，从单 analyte 检测迈向多组学整合时代。