新型CDK2/CDK9抑制剂fadraciclib通过靶向细胞存活与DNA损伤通路协同encorafenib抑制BRAFV600E结直肠癌

本研究针对BRAFV600E突变结直肠癌（CRC）患者对BRAF抑制剂单药耐药的关键临床问题，通过CDK2/CDK9双靶点抑制剂fadraciclib与encorafenib的联合治疗策略，揭示了其通过下调MCL-1、诱导Bax依赖性凋亡及抑制RNA聚合酶II转录的协同抗肿瘤机制。该研究为克服BRAFV600ECRC的固有耐药性提供了新靶点，相关成果发表于《Oncogenesis》。

　　

BRAF^V600E突变在8%-12%的结直肠癌（CRC）患者中检出，这类患者预后极差且对现有靶向治疗响应率不足5%。尽管BRAF抑制剂encorafenib与抗EGFR抗体联用已被FDA批准，但患者中位生存期仅延长3个月，其根本原因在于BRAF^V600E通过上调抗凋亡蛋白MCL-1介导的固有耐药性。这一临床困境呼唤能同时阻断多通路的新型治疗策略。

Mayo Clinic的研究团队在《Oncogenesis》发表的研究中，首次证实CDK2/CDK9双靶点抑制剂fadraciclib可通过转录抑制MCL-1、诱导DNA损伤和细胞周期阻滞，与encorafenib产生协同抗肿瘤效应。研究人员利用等基因BRAF^V600E突变CRC细胞系（RKO+/+、A19+/-、T29-/-）及斑马鱼异种移植模型，结合TCGA数据库分析，系统阐明了该联合治疗的分子机制与临床转化价值。

研究采用siRNA基因敲降、流式细胞术检测凋亡与周期、免疫印迹分析信号通路、克隆形成实验及斑马鱼活体成像等关键技术。通过TCGA队列验证了CDK2/9表达与BRAF突变状态及预后的相关性。

CDK2/9抑制诱导凋亡与生长抑制

在BRAF^V600E等基因细胞中，fadraciclib呈现基因剂量依赖性凋亡诱导效应，最高见于双等位基因突变的RKO细胞。该药物通过抑制RNA聚合酶II Ser2/Ser5磷酸化阻断转录，同时降低p-Rb^Ser780和cyclin D1表达，导致G1/S期阻滞。

协同作用机制解析

双敲降CDK2/9可模拟fadraciclib作用，增强p-H2AX^Ser139介导的DNA损伤信号。转录抑制剂放线菌素D与fadraciclib协同下调MCL-1/Bcl-xL，证实其转录调控机制。斑马鱼模型显示联合治疗使肿瘤体积缩小52%（p<0.001），并激活caspase-3。

临床相关性验证

TCGA分析揭示BRAF突变CRC中CDK2表达显著升高（p<0.001），且CDK9高表达患者总生存期更短。这为靶向CDK2/9的精准治疗提供了分子分型依据。

该研究创新性提出：fadraciclib通过双重抑制CDK2（细胞周期）和CDK9（转录调控）克服BRAF^V600E耐药，其与encorafenib的协同效应为临床转化奠定基础。尤其值得注意的是，fadraciclib在1μM浓度（已达临床可实现血药浓度）即可显著抑制肿瘤生长，这为后续临床试验设计提供了关键剂量参考。研究不仅揭示了CDK2/9-MCL-1-p53通路网络在BRAF突变CRC中的核心地位，更开创了基于细胞周期与转录调控联合干预的新治疗范式。