单核细胞增生李斯特菌血清型4b在哈密瓜表皮和果肉上的温度适应性竞争优势研究

本研究通过混合接种实验揭示单核细胞增生李斯特菌（L. monocytogenes）血清型4b在哈密瓜表皮和果肉上的显著竞争优势，发现其适应力优于血清型1/2a和4b-v1（ST382），为食源性病原体在农产品中的生态适应性提供了关键数据。

　　

ABSTRACT

单核细胞增生李斯特菌（L. monocytogenes）是一种与农产品相关暴发事件密切相关的食源性病原体。自然界中，该菌作为腐生菌广泛存在于农业区域和地表水中。其低温生长特性导致污染食品在冷藏期间仍能增殖。多数暴发由血清型1/2a和4b引起，而近十年出现的非典型血清型4b变异株4b-v1（序列型ST382）引发了三次全国性农产品相关暴发。本研究通过混合接种实验评估ST382在哈密瓜表面的适应性，发现血清型4b菌株在表皮上的恢复率显著高于1/2a和4b-v1，而在果肉上4b与4b-v1无显著差异，但均优于1/2a。温度对竞争结果无显著影响，表明ST382在哈密瓜上未显示适应性优势。

IMPORTANCE

血清型4b菌株在混合群体中表现出持续的竞争优势，尤其在哈密瓜表皮上。这一发现为理解不同李斯特菌亚型在农产品中的生态分布提供了实验依据，对食源性疾病防控具有指导意义。

INTRODUCTION

单核细胞增生李斯特菌是革兰阳性菌，通过污染食品引发李斯特菌病。其14种血清型中，1/2a、1/2b和4b最常见于人类疾病。4b-v1亚型因携带lmo0737基因（原为1/2a特异性基因）而表现出独特PCR分型特征。ST382在环境分离株中过度出现，尤其在加州沿海绿叶蔬菜产区的表层水调查中占比达19%。本研究旨在探究ST382是否在哈密瓜表面比1/2a和典型4b菌株更具生长优势。

RESULTS

菌株混合接种后的总生长量

所有菌株在TSYE肉汤中生长动力学相似。哈密瓜表皮和果肉接种后，25°C和4°C条件下总菌量恢复无差异，但果肉上的菌量显著高于表皮（25°C：7.5–8.0 vs 6.0–6.5 log CFU/片；4°C：5.5–6.0 vs 5.0–5.5 log CFU/片）。

血清型恢复差异

血清型4b在表皮上的恢复率（约50%）显著高于1/2a和4b-v1；果肉上4b与4b-v1无差异，但均高于1/2a。例外出现在混合物4中，1/2a菌株（源自2005年熟肉暴发）恢复率显著升高，可能与特定菌株特性有关。

DISCUSSION

2011年哈密瓜暴发涉及血清型1/2a和1/2b，但本研究表明4b菌株更具适应性优势。ST382虽在环境中富集，但在农产品竞争中未显现优势。菌株适应性可能受基因组微变异（如RNA解旋酶突变）或质粒携带影响。值得注意的是，不同农产品表面（如生菜与哈密瓜）的竞争机制可能存在差异，暗示生态位特异性适应策略。

MATERIALS AND METHODS

实验采用来自暴发、环境和食品的菌株，按1:1:1比例混合接种哈密瓜片段。通过qPCR（靶向lmo0737和ORF2110基因）分型恢复菌落。统计分析采用Tukey多重比较和t检验，显著性阈值P < 0.05。

ACKNOWLEDGMENTS

研究由美国农业部农业研究服务局CRIS项目2030-42000-052-00D资助，声明无利益冲突。