反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同步测定鸭嘴花叶中豆甾醇与β-谷甾醇及其生物活性研究

本研究通过RP-HPLC技术建立了鸭嘴花叶中豆甾醇与β-谷甾醇的同步测定方法，并首次系统评估其乙醇提取物的抗真菌（尤其针对Candida spp.）和抗氧化活性。结果显示提取物对C. guilliermondii抑制效果最佳（12.45±0.02 mm），MIC值31.25–61.5 μg/mL，抗氧化活性（IC50 0.2002 mg/mL）优于BHT标准品，为植物源抗真菌剂开发提供新依据。

　　

在真菌耐药性问题日益严峻的背景下，寻找新型植物源抗真菌剂成为研究热点。鸭嘴花（Justicia adhatoda）作为传统药用植物，其活性成分与作用机制尚未充分阐明。尤其针对临床常见的Candida spp.感染，现有药物存在毒副作用和耐药性等问题，亟需开发更安全有效的替代方案。

Salahaddin University-Erbil化学系的Fuad O. Abdullah团队在《Natural Product Research》发表研究，采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)同步测定鸭嘴花叶中豆甾醇(stigmasterol)和β-谷甾醇(β-sitosterol)，并首次通过HPLC-MS/MS技术鉴定出乙醇提取物中的关键活性成分。研究人员系统评估了提取物对5种Candida spp.的抑制效果，发现其对C. guilliermondii的抑制圈直径达12.45±0.02 mm，最小抑菌浓度(MIC)范围为31.25–61.5 μg/mL。更值得注意的是，提取物抗氧化活性(IC₅₀ 0.2002 mg/mL)显著优于常用抗氧化剂BHT。

关键技术包括：1) RP-HPLC建立植物甾醇定量分析方法；2) HPLC-MS/MS进行成分鉴定；3) 琼脂扩散法测定抗真菌活性；4) DPPH自由基清除实验评估抗氧化能力。

【化合物鉴定】

通过HPLC-MS/MS分析发现提取物富含奎宁酸(1925.63 μg/g)、苹果酸(1471.05 μg/g)、没食子酸(140.31 μg/g)和 cosmosiin(133.85 μg/g)，这些成分与生物活性显著相关。

【抗真菌活性】

对C. guilliermondii、C. tropicalis和C. famata的抑制实验显示，提取物对不同菌株具有选择性抑制效果，MIC值与抑制圈直径呈负相关，表明其具有剂量依赖性。

【抗氧化活性】

DPPH实验证实提取物的IC₅₀值(0.2002 mg/mL)低于BHT(0.2100 mg/mL)，其抗氧化能力主要归因于酚酸类成分的协同作用。

该研究首次建立鸭嘴花叶中植物甾醇的RP-HPLC定量方法，并揭示其乙醇提取物具有双重生物活性。特别值得注意的是，提取物对临床常见致病菌Candida spp.的抑制效果与常规抗真菌药相当，而抗氧化活性优于合成抗氧化剂，这为开发兼具抗感染和抗氧化功能的植物药提供了重要依据。研究结果不仅丰富了传统药用植物的现代科学认知，也为解决真菌耐药性问题提供了新思路。