HEp-2细胞间接免疫荧光中AC-18（胞质离散点状）模式的临床意义：一项台湾多中心研究的深度解析

这篇综述系统探讨了CRISPR/Cas（如Cas9、Cas12、Cas13）和Argonaute（Ago）系统在病毒检测中的突破性应用，涵盖单重（如DETECTR、CFNS）和多重（如MiCaR、PAND）检测技术，并指出其高灵敏度（attomolar级）、单碱基特异性及POCT（床旁检测）潜力，为传染病精准防控提供新范式。

　　

Highlight

CRISPR/Cas系统

CRISPR/Cas是原核生物的关键适应性免疫机制，通过效应蛋白（如Cas9、Cas12、Cas13）实现外源核酸的识别与切割。其中，Cas12的trans-切割活性可实现attomolar级灵敏度，而Cas13的RNA靶向特性为RNA病毒（如SARS-CoV-2）检测提供新工具。

高优先级病毒检测靶标

包括SARS-CoV-2、HIV、HBV等对社会影响重大的病毒。便携式检测技术将显著提升这类疾病的诊断效率，例如基于Cas13的CFNS方法对SARS-CoV-2灵敏度达1拷贝/mL。

单病毒感染中单核苷酸多态性(SNP)鉴别技术

CRISPR/Cas和Ago系统通过crRNA设计实现单碱基分辨率，如DACD/RACD利用Cas9的trans-切割活性，而PAND系统通过Ago生成的引导序列实现5重检测。

多亚型与混合感染检测

微流控芯片（如MiCaR）结合CRISPR/Cas12a与多重重组酶聚合酶扩增(mRPA)，可同步检测30种靶标；SHERLOCKv2通过多酶单反应系统实现4重检测。

Conclusion

CRISPR/Cas与Ago系统在病毒诊断中各具优势：前者依赖PAM序列但灵敏度极高，后者无需PAM且可级联扩增信号。未来需优化crRNA设计、开发稳定试剂，并推动POCT设备落地。