快速qPCR检测黄姑鱼感染拟态假单胞菌及抗菌肽动态变化机制研究

本研究通过建立靶向gyrB基因的高精度qPCR方法（标准曲线：y = 119538.14e?0.58x - 3.45，R2 = 0.99），首次系统揭示了拟态假单胞菌（Pseudomonas plecoglossicida）感染黄姑鱼（Larimichthys polyactis）过程中细菌载量与三种抗菌肽（AMPs）的动态关联，发现Lp_hepcidin表达与菌量呈显著负相关，为水产养殖中内脏白结节病（VWND）的早期诊断和抗病育种提供了新策略。

Highlight

拟态假单胞菌（Pseudomonas plecoglossicida）菌株XSLPP-1展现出惊人毒力——其96小时半数致死浓度（LC₅₀）低至1×10³ CFU/mL，通过16S rRNA基因测序（99.72%相似性）和系统发育分析确认为高致病性菌株。

Discussion

内脏白结节病（VWND）正从传统革兰氏阳性病原体（如诺卡氏菌Nocardia seriolae）向拟态假单胞菌等革兰氏阴性菌转移。菌株XSLPP-1在28℃时生长速率最快（代时41.6分钟），其动态感染曲线显示：感染后48小时肝脏菌量达到峰值（1.24×10⁷ copies/mg），与Lp_hepcidin表达量呈显著负相关（r = -0.82, p < 0.01），暗示该抗菌肽可能通过破坏细菌膜电位发挥防御作用。

Conclusions

本研究建立的gyrB-qPCR方法可精准量化VWND病原负荷，首次揭示Lp_hepcidin可作为抗病标志物——其肝脏表达水平每增加1倍，细菌载量下降63.2%。这为开发基于抗菌肽（AMPs）的生态渔药提供了理论依据。