三氯生通过TCF12-RASSF8信号通路抑制滋养层细胞迁移的分子机制研究

本研究揭示了抗菌剂三氯生(TCS)通过重塑增强子(H3K27ac标记)景观，激活转录因子TCF12并上调其靶基因RASSF8，从而抑制人绒毛外滋养层细胞(HTR-8/SVneo)迁移的新机制。研究采用RNA-seq和ChIP-seq技术，首次阐明TCS在1-100μM浓度范围内呈现剂量依赖性毒性，为理解其生殖毒性提供了表观遗传学视角。

　　

Highlight

三氯生(TCS)暴露显著抑制HTR-8/SVneo细胞迁移能力

TCS在低至1μM浓度时即可显著抑制滋养层细胞迁移，这种效应独立于细胞毒性作用（10μM以上才出现明显细胞活力下降）。划痕实验和Transwell迁移实验均证实，TCS处理24小时后细胞迁移面积减少40%-60%，呈现典型的剂量-效应关系。

TCS重塑增强子景观并激活TCF12-RASSF8信号轴

通过整合RNA-seq和ChIP-seq分析发现，10μM TCS处理导致1,287个增强子区域（H3K27ac标记）发生显著改变。Motif富集分析鉴定出TCF12是受影响最显著的转录因子。有趣的是，TCS同时上调TCF12及其靶基因RASSF8的表达水平达2-3倍。

TCF12直接调控RASSF8表达并介导迁移抑制

基因敲除实验显示，TCF12沉默可使RASSF8表达降低60%，并部分逆转TCS诱导的迁移抑制效应。荧光素酶报告基因实验进一步证实，TCF12通过直接结合RASSF8启动子区（-500至-200bp）激活其转录。这些发现揭示了TCF12-RASSF8通路在TCS毒性中的核心作用。

Discussion

滋养层细胞迁移受损与多种妊娠并发症相关

研究首次阐明TCS通过表观遗传机制（增强子重编程）干扰滋养层功能。与肿瘤转移不同，滋养层细胞的"可控侵袭"对胚胎植入和胎盘形成至关重要。TCS诱导的迁移缺陷可能解释临床观察到的植入失败和胎盘发育异常现象。

Conclusions

本研究不仅揭示TCF12-RASSF8是调控滋养层迁移的新通路，更为环境污染物致生殖障碍的干预提供了潜在靶点。发现低浓度TCS（1μM，接近人体暴露水平）即可产生生物学效应，对公共卫生安全具有重要警示意义。