Agrimonolide通过抑制胆汁酸排泄转运蛋白缓解胆汁淤积性肝损伤和巨噬细胞浸润的机制研究

为解决胆汁淤积性肝病缺乏有效治疗手段的问题，上海交通大学医学院附属第六人民医院药学部团队开展Agrimonolide(AM)药理机制研究。通过DDC诱导的小鼠模型证实，AM通过抑制胆汁酸排泄转运蛋白BSEP/MRP4，显著改善胆管增生、纤维化和巨噬细胞浸润，为开发新型抗胆汁淤积药物提供理论依据。

　　

胆汁淤积性肝病是困扰全球10-20%人群的重大健康问题，目前临床主要药物熊去氧胆酸(UDCA)和奥贝胆酸(OCA)存在疗效局限和皮肤瘙痒等副作用。传统中药仙鹤草(Agrimonia pilosa Ledeb)虽在古籍中记载具有利胆退黄功效，但其活性成分Agrimonolide(AM)的作用机制尚未阐明。

上海交通大学医学院附属第六人民医院药学部Leng Han、Quanjun Yang团队在《International Immunopharmacology》发表研究，通过建立3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢可力丁(DDC)诱导的小鼠慢性胆汁淤积模型，结合RNA测序、LC-MS/MS胆汁酸分析和流式细胞术等技术，系统评估AM的剂量效应及其分子机制。研究发现30-90 mg/kg AM治疗可剂量依赖性改善胆管增生、胆栓形成和"洋葱皮样"纤维化，降低血清ALT/AST水平和肝脏羟脯氨酸含量。机制研究表明，AM通过上调胆汁酸外排转运体Bsep/Mrp2表达，同时抑制循环转运体Oatp2/Mrp3/Mrp4，重塑胆汁酸代谢稳态。关键实验证实，胆汁酸转运抑制剂BMS-986020能逆转AM对胆管增生、纤维化和F4/80⁺巨噬细胞浸润的改善作用。

研究采用的主要技术包括：DDC饮食诱导的C57BL/6J小鼠模型建立、肝脏组织RNA测序分析、靶向LC-MS/MS检测53种胆汁酸、流式细胞术定量Kupffer细胞(CD11b^middle/F4/80^high)和单核来源巨噬细胞(MDMs, CD11b^high/F4/80^middle)亚群。

在"AM改善DDC诱导的剂量依赖性胆汁淤积性肝损伤"部分，研究发现90 mg/kg AM使肝体比从11.2%降至5.3%，血清总胆红素降低62%。组织学显示AM显著减少胆管增生和"洋葱皮样"纤维化。RNA测序揭示AM调控254个下调基因和197个上调基因，主要涉及ECM重组和胶原降解通路。

关于"AM减轻肝纤维化"的机制，研究显示AM使肝脏羟脯氨酸从86.8 μg/mg降至32.3 μg/mg，下调α-SMA、Col1a1等纤维化标志物表达。免疫组化证实AM减少α-SMA⁺肌成纤维细胞活化，这与GSEA分析显示的"ECM组织"通路抑制一致。

在炎症调控方面，AM治疗使TNF-α、IL-6 mRNA表达降低3-5倍，流式细胞术显示MDMs比例从28.4%降至12.7%。特别值得注意的是，CK19⁺胆管细胞增殖减少与胆汁酸代谢重编程相关——AM上调经典合成途径限速酶Cyp7a1表达2.1倍，同时使毒性胆汁酸T-β-MCA水平下降67%。

研究结论部分强调，AM通过双重调控胆汁酸转运系统发挥治疗作用：一方面促进Bsep/Mrp2介导的胆汁排泄，另一方面抑制Mrp3/Mrp4导致的胆汁酸回流。这种独特机制使其区别于现有药物UDCA和OCA，为开发兼具抗纤维化和抗炎作用的胆汁淤积治疗药物提供了新思路。讨论部分指出，虽然AM作为香豆素衍生物需关注凝血功能影响，但其多靶点作用特征和传统用药安全性记录，使其成为极具转化潜力的候选药物。该研究不仅阐明了仙鹤草"利胆退黄"的传统药效物质基础，也为胆汁淤积性肝病的整合治疗提供了新策略。