p53功能获得性突变通过上调uPAR表达促进胰腺导管腺癌吉西他滨耐药及侵袭转移的机制研究

胰腺导管腺癌(PDAC)化疗耐药机制亟待阐明。加州大学圣地亚哥分校团队发现，TP53功能获得性(GoF)突变通过上调PLAUR(uPAR)表达，激活ERK1/2-RSK通路，促进PDAC细胞在吉西他滨治疗后的迁移侵袭。该研究为靶向p53-uPAR轴克服化疗耐药提供新策略，发表于《Journal of Biological Chemistry》。

　　

胰腺导管腺癌（PDAC）被称为"癌中之王"，五年生存率不足10%，化疗耐药是治疗失败的主要原因。TP53作为最重要的抑癌基因之一，其突变在PDAC中发生率高达75%，但突变型p53如何促进化疗耐药仍不清楚。更棘手的是，临床发现化疗后PDAC常表现出更强的侵袭转移能力，这种"越治越恶"的现象背后隐藏着怎样的分子机制？美国加州大学圣地亚哥分校医学院（University of California San Diego School of Medicine）病理学系的Carlotta Zampieri和Steven L. Gonias团队通过多组学分析结合功能实验，揭示了uPAR（urokinase receptor）作为p53功能获得性突变关键效应分子的重要作用。

研究人员运用TCGA数据库挖掘、细胞功能实验（包括MTT法检测细胞活力、Transwell侵袭实验、伤口愈合实验等）和单细胞RNA测序（scRNA-Seq）等技术。特别分析了6例未经治疗和6例化疗后PDAC患者的单细胞转录组数据（GSE205013）。

PLAUR表达与TP53突变及PDAC不良预后相关

通过分析TCGA数据发现，PDAC组织中PLAUR表达显著高于癌旁组织，且与肿瘤分期正相关。TP53错义突变患者PLAUR表达显著高于野生型患者，高PLAUR表达组的总生存期（OS）、无病生存期（DFS）和无进展生存期（PFS）均显著缩短。

吉西他滨处理上调PDAC细胞uPAR蛋白水平

在携带TP53 R273H突变的PANC1细胞和R248W突变的MIA PaCa-2细胞中，吉西他滨处理显著增加uPAR蛋白表达，且撤药后uPAR水平持续升高。MTT实验显示两种细胞对吉西他滨均表现出一定耐药性，处理后仍有大量细胞存活。

TP53 GoF突变驱动吉西他滨诱导的uPAR上调

siRNA沉默TP53可阻断吉西他滨诱导的uPAR蛋白和mRNA表达增加，证实了p53对PLAUR的调控作用。RT-qPCR显示，TP53 siRNA使PANC1和MIA PaCa-2细胞中PLAUR mRNA分别降低约80%和70%。

uPAR通过ERK1/2-RSK通路促进PDAC细胞迁移侵袭

吉西他滨处理48-72小时显著增加ERK1/2磷酸化，沉默PLAUR或TP53均可阻断这一效应。值得注意的是，虽然表皮生长因子受体(EGFR)已知可与uPAR协同激活信号，但EGFR沉默不影响uPAR介导的ERK1/2激活。功能实验显示，uPAR促进吉西他滨处理后PDAC细胞的迁移、侵袭和细胞铺展面积增加。

单细胞测序揭示uPAR⁺恶性上皮细胞的侵袭特性

分析12例PDAC样本的scRNA-seq数据发现，化疗后存活的上皮细胞中PLAUR表达显著升高。高表达PLAUR的细胞（前10%）具有更高的拷贝数不稳定性(CNI)评分、基底细胞样特征和上皮间质转化(EMT)特征，主要富集在增殖活跃的G2细胞簇中。

该研究首次系统阐明了uPAR作为p53功能获得性突变关键效应分子的作用机制。在临床层面，解释了为何TP53突变型PDAC患者预后更差，并为联合靶向p53-uPAR-ERK1/2轴克服化疗耐药提供了理论依据。在转化医学层面，uPAR持续升高的特征提示其可作为动态监测化疗疗效的生物标志物。更深远的意义在于，这项研究为理解"化疗压力选择"现象提供了分子解释——化疗药物通过激活p53-uPAR轴，反而筛选出更具侵袭性的肿瘤细胞亚群。未来研究可进一步探索靶向这一通路的小分子抑制剂与化疗的联合治疗方案。