CELF1通过调控ATG5介导的自噬促进急性髓系白血病耐药性的分子机制研究

本研究针对急性髓系白血病(AML)化疗耐药难题，揭示了RNA结合蛋白CELF1通过稳定ATG5 mRNA激活保护性自噬通路的关键机制。研究人员通过构建ADR耐药细胞株，结合RNA-seq和体内外功能实验，证实CELF1-ATG5轴可显著增强AML细胞对阿霉素(ADR)的耐药性，为克服临床耐药提供了新靶点。该成果发表于《Cell Death and Disease》，为AML精准治疗策略开发奠定理论基础。

　　

在血液肿瘤领域，急性髓系白血病(AML)犹如一匹难以驯服的"野马"，尽管治疗手段不断进步，但化疗耐药导致的复发仍是临床面临的重大挑战。其中，阿霉素(ADR)作为蒽环类化疗药物的代表，其耐药性问题尤为突出。近年来，科学家们逐渐将目光投向RNA结合蛋白(RBP)这一神秘的"基因调控者"，它们在肿瘤发生发展中的角色正被逐步揭开。

中国研究人员通过系统研究，在《Cell Death and Disease》发表重要成果，首次揭示了CELF1-ATG5分子轴在AML耐药中的关键作用。这项研究如同打开了一扇新窗口，让我们得以窥见RNA层面调控化疗耐药的精细机制。

研究团队采用多组学联用策略，主要技术路线包括：基于TCGA数据库的泛癌分析确定CELF1临床意义；通过梯度浓度诱导建立KG-1/ADR和HL-60/ADR耐药细胞株；运用RNA-seq筛选下游靶基因；结合RNA免疫共沉淀(RIP)和RNA pull-down验证CELF1-ATG5直接互作；建立AML异种移植小鼠模型进行体内验证。

CELF1是AML细胞ADR耐药的潜在靶点

通过TCGA数据分析发现，CELF1在AML中呈现显著高表达。研究人员构建的ADR耐药细胞株中，CELF1表达较亲本细胞升高约10倍，且与临床FAB分型显著相关。耐药株的IC₅₀值达到亲本细胞的10倍以上，这一发现为后续机制探索奠定基础。

CELF1敲除促进药物敏感性并抑制自噬

当用siRNA敲低CELF1后，耐药细胞的ADR敏感性显著提高，凋亡率增加2-3倍。透射电镜观察到自噬体数量锐减，Western blot显示LC3-II/LC3-I比值下降而p62积累，mRFP-GFP-LC3双荧光系统证实自噬流被阻断。这些结果如同拼图般拼出了CELF1调控自噬的完整证据链。

ATG5是CELF1的下游关键靶标

RNA-seq筛选出的987个差异基因中，ATG5作为自噬核心基因脱颖而出。RIP-qPCR证实CELF1可直接结合ATG5 mRNA，而RNA稳定性实验显示CELF1敲除使ATG5 mRNA半衰期缩短40%。尤为关键的是，研究人员在ATG5的CDS区鉴定出两个UGUGUG结合基序，通过截断体实验和双荧光素酶报告系统，首次阐明CELF1通过该基序维持ATG5 mRNA稳定性。

CELF1-ATG5轴调控自噬促进耐药

在挽救实验中，ATG5过表达可逆转CELF1敲除导致的ADR敏感性增强。小鼠模型显示，CELF1敲除组白血病负荷(CD45⁺细胞占比7.85%)显著低于对照组(46.6%)，而ATG5回补使CD45⁺比例回升至24.6%。这些数据如同三把钥匙，层层解锁了CELF1-ATG5-自噬的分子调控网络。

这项研究的重要意义在于：首次揭示CELF1作为RBP通过非经典途径调控自噬的新机制；阐明UGUGUG基序在mRNA稳定性调控中的生物学功能；为克服AML化疗耐药提供了双靶点干预策略——既可靶向CELF1的RNA结合域开发小分子抑制剂，也可联合自噬抑制剂如BafA1增强化疗敏感性。正如研究者指出，这一发现为理解RBPs在肿瘤耐药中的全局作用提供了范式转变，将推动AML治疗进入"RNA调控"的新纪元。