Allplex HPV HR检测试剂盒在SurePath样本中满足国际指南要求：作为第二代HPV对照检测的临床验证

本研究针对宫颈癌筛查中HPV检测的临床验证需求，评估了Allplex HPV HR Detection试剂盒在SurePath保存液样本中的性能。通过与第二代对照检测BD Onclarity HPV assay对比，证实Allplex对CIN2+的绝对临床灵敏度达98.7%，特异性达92.5%，且满足国际指南要求的非劣效性标准（p<0.002）。该研究首次验证了仅靶向12种IARC高危HPV基因型的检测方案，为优化宫颈筛查策略提供新选择。

　　

宫颈癌筛查领域正经历从细胞学检测向人乳头瘤病毒(HPV)分子检测的范式转变，但检测技术的标准化仍是重大挑战。现有HPV检测多包含14-15种高危型别，而国际癌症研究机构(IARC)2024年最新分类将HPV66/68移出致癌组，仅保留12种高危型别(HPV16/18/31/33/35/39/45/51/52/56/58/59)。这种分类变化使得多数商用检测试剂面临"过度检测"问题，可能造成不必要的医疗干预。

针对这一技术缺口，卢布尔雅那大学医学院微生物与免疫学研究所（University of Ljubljana, Faculty of Medicine, Institute of Microbiology and Immunology）的Anja O?trbenk团队联合丹麦研究者，在《Journal of Clinical Virology》发表了Allplex HPV HR Detection试剂盒的多中心验证研究。该试剂盒采用多重温度检测技术(MuDT?)结合DPO?/TOCE?系统，可独立检测12种IARC高危型别及HPV66/68，其创新性在于通过E6/E7和L1双区域靶向HPV16/18，L1区域靶向其他型别。

研究采用丹麦宫颈筛查队列的877例SurePath保存样本，包括801例连续筛查样本和76例组织学确诊CIN2+病例。通过对比BD Onclarity HPV assay（第二代对照检测），采用非劣效性评分检验分析相对灵敏度/特异性。实验流程包含核酸提取、实时荧光PCR、Ct值阈值判定等标准化操作。

在临床评估部分，数据显示：Allplex对CIN2+的绝对灵敏度为98.7%(75/76)，与Onclarity的100%相比，相对灵敏度达0.99(95%CI:0.96-1.01)；特异性方面两者均为92.5%，满足国际指南要求的非劣效阈值(p=0.0018)。值得注意的是，对CIN3+病例的灵敏度达100%，显示对高级别病变的优异识别能力。

重复性验证结果显示：实验室内总体符合率99.2%(496/500)，基因型水平符合率99.6-100%；实验室间验证显示总体符合率99.6%，证实检测流程的稳健性。这些数据与前期在ThinPrep样本中的验证结果一致，表明该试剂盒不受保存液类型影响。

该研究的突破性在于：首次完成符合IARC 12型检测方案的临床验证，为WHO推荐的低价数检测方案提供实证支持。作为第三个独立验证研究，Allplex由此满足第二代对照检测的全部标准：需在至少三项研究中保持≥95%相对灵敏度和≥98%相对特异性。其全分型能力为新型检测的验证提供参照，而排除HPV66/68的设计有望减少17%的假阳性转诊。

研究者特别指出，该试剂盒的临床优势体现在三方面：1) 适配主流保存液类型；2) 通过Ct值阈值优化实现风险分层；3) 为扩展基因型筛查算法提供技术基础。随着瑞典、丹麦等国逐步采用基因型风险分层策略，此类经严格验证的全分型检测将成为标准化筛查的关键工具。