抗骨桥蛋白抗体能够在抗凝血酶酶切的骨桥蛋白敲入小鼠中重现肿瘤抑制表型

《Journal of Thrombosis and Haemostasis》：Anti-osteopontin antibodies replicate the tumor suppression phenotype in thrombin cleavage-resistant osteopontin knock-in mice

抑制血栓素切割的抗体mA6和mC6R可有效抑制B16黑色素瘤及CT26结肠癌细胞的生长，并延长抗体半衰期。

　　

秦周 | 雷赵 | 蒂莫西·迈尔斯 | 约翰·莫瑟 | 劳伦斯·L·K·梁

斯坦福大学医学院血液科，美国加利福尼亚州斯坦福市 94305

摘要

背景

多功能促炎基质细胞蛋白骨桥蛋白（OPN）是多种人类癌症的预后标志物。OPN 被凝血酶切割后，在 N 端切割片段的 C 端会暴露出一个与 α₄β₁ 和 α₉β₁ 整合素结合的位点（OPN-R）。阻止凝血酶对全长 OPN（OPN-FL）的切割可以改善肿瘤模型的治疗效果。

方法

在 B16 小鼠黑色素瘤皮下植入模型和转移模型中，测试了一种能结合 OPN-FL 上凝血酶切割位点（mA6）的单克隆抗体，以及另一种能结合 OPN-R C 端的单克隆抗体（mC6R）。

结果

纯化的 mA6 以高亲和力结合全长 OPN，而 mC6R 以高亲和力结合 OPN-R，无论是对小鼠还是人类的 OPN 都如此。mA6 能抑制小鼠和人类 OPN-FL 的凝血酶切割，但不会影响凝血或血小板聚集试验。这两种抗体在小鼠体内的半衰期均超过 7 天。接受任一抗体治疗的小鼠，其皮下模型中的 B16 黑色素瘤生长受到抑制，并且肺转移数量少于接受野生型（WT）小鼠的对照组。抗体治疗的效果与表达抗凝血酶 OPN 的 OPN-KI 小鼠相似。在 Balb/c 小鼠中，两种抗体均能抑制结肠癌细胞系 CT26 的生长。

结论

两种抗体均能抑制两种模型中的 B16 黑色素瘤生长，同时也能抑制 CT26 结肠癌的生长。由于 mC6R 的效果与 mA6 相似，这表明凝血酶切割 OPN-FL 产生的活性 OPN 片段就是 OPN-R。