黑胡椒病毒快速检测新突破：侧向流动免疫层析技术同步筛查黄斑驳病毒和黄瓜花叶病毒

本文推荐一种基于金纳米颗粒-抗体复合物的侧向流动免疫层析技术(LFIA)，可同时检测黑胡椒中黄斑驳病毒(PYMoV)和黄瓜花叶病毒(CMV)。该技术通过优化硝酸纤维素膜(10μm孔径)、检测线(0.75mg/ml抗体)等参数，实现PYMoV(100ng)和CMV(50ng)的现场快速检测，为无化学防治的胡椒病毒病管理提供新工具。

　　

Highlight

样品选择

通过病毒特异性引物对AIB 945-946(PYMoV)和AIB 1-2(CMV)的PCR/RT-PCR筛选，确定阳性与健康对照样本（附图1）。

重组表达载体构建

采用pCOLD和pRSET A两种载体系统：

• PYMoV衣壳蛋白(CP)通过引物对AIB 645-644/AIB 645-801扩增

• CMV CP通过引物对AIB 1-2/AIB 1-802扩增

表达产物经SDS-PAGE验证后用于兔免疫

讨论

黑胡椒作为全球最重要的香料作物，其矮化病可导致85%产量损失。本研究开发的LFIA技术突破传统PCR方法局限：

? 10分钟现场出结果

? 无需核酸提取步骤

? 可检测其他胡椒属植物（如荜茇和蒌叶）

该技术为建立无病毒种苗繁育体系提供关键支持，填补了该领域现场快速检测的技术空白。

利益冲突声明

作者声明无任何可能影响研究结果的财务或个人关系。

致谢

感谢印度科学与工程研究委员会(SERB)CRG/2021/000292项目资助，以及印度香料研究所(ICAR-IISR)提供的实验条件。第一作者获大学拨款委员会(UGC)青年研究奖学金支持。

人类与动物实验声明

本研究未涉及任何人体或动物实验。