Asiaticoside通过抑制RhoF–NF-κB/MAPK信号通路减轻巨噬细胞炎症反应从而缓解动脉粥样硬化进展

研究人员针对动脉粥样硬化(AS)这一慢性炎症疾病，探究了中药单体Asiaticoside(AT)通过调控巨噬细胞RhoF–NF-κB/MAPK信号通路发挥抗炎作用的分子机制。该研究采用高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠模型和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激的巨噬细胞模型，结合网络药理学和RNA测序技术，发现AT通过促进RhoF蛋白的蛋白酶体降解，显著抑制NF-κB和MAPK信号通路活化，降低TNF-α、IL-6等炎症因子表达，为开发新型抗AS药物提供了新靶点。

　　

动脉粥样硬化(AS)是心血管疾病的主要病理基础，其发病机制复杂，涉及脂质代谢紊乱和慢性炎症反应。尽管他汀类药物是当前AS治疗的一线药物，但约10-15%患者会出现肌病、糖尿病风险增加等不良反应，且存在残余炎症风险。因此，寻找既能有效抗炎又安全性好的替代疗法成为研究热点。传统中药因其多靶点作用特点展现出独特优势，其中源自积雪草的Asiaticoside(AT)已被证实具有广泛的抗炎活性，但其抗AS作用机制尚不明确。

山东大学齐鲁医院心血管重构与功能研究教育部重点实验室的研究团队在《Phytomedicine》发表论文，系统研究了AT对AS的干预作用及其分子机制。研究采用高脂饮食诱导的ApoE^-/-小鼠模型模拟人类AS病变，通过油红O染色、免疫组化等技术评估斑块负荷；利用网络药理学和RNA测序筛选关键靶点；结合分子对接、表面等离子共振(SPR)和分子动力学模拟验证AT与靶蛋白相互作用；最后通过蛋白酶体抑制剂MG132和溶酶体抑制剂氯喹(CQ)处理明确AT调控靶蛋白降解的途径。

研究结果显示：

1. AT治疗减轻体内动脉粥样硬化病变

   AT(40 mg/kg)处理16周显著减少ApoE^-/-小鼠主动脉斑块面积，增加斑块内α-SMA阳性的平滑肌细胞和胶原含量，同时降低巨噬细胞标志物MOMA-2表达，提示斑块稳定性增强。值得注意的是，AT在不影响血脂水平的情况下发挥这些保护作用。

2. AT通过抗炎作用缓解AS进展

   ELISA和免疫组化检测发现AT显著降低血清和斑块中TNF-α、IL-6、MCP-1等促炎因子水平，Western blot证实AT抑制主动脉组织NF-κB p65和p38 MAPK磷酸化。

3. AT的巨噬细胞抗炎机制研究

   体外实验显示AT以剂量依赖性方式抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞炎症反应。网络药理学和RNA-Seq分析共同锁定RhoF为关键靶点，免疫荧光证实RhoF与斑块内巨噬细胞共定位，且AT处理显著降低其表达。

4. AT靶向RhoF调控NF-κB/MAPK通路

   分子对接显示AT与RhoF结合能达-9.24 kcal/mol，形成6个氢键；分子动力学模拟证实复合物在100 ns内保持稳定。功能实验证明AT通过蛋白酶体途径促进RhoF降解，进而抑制下游NF-κB/MAPK信号活化。过表达RhoF可逆转AT的抗炎效应，证实RhoF是AT发挥作用的关键介质。

这项研究首次揭示AT通过靶向巨噬细胞RhoF蛋白，促进其蛋白酶体降解，进而抑制NF-κB/MAPK信号通路发挥抗AS作用。与现有抗炎药物相比，AT独特的蛋白稳定性调控机制可能带来更低的副作用风险。研究为开发新型抗AS药物提供了理论依据，同时拓展了中药单体多靶点治疗复杂疾病的研发思路。未来需要进一步优化AT的给药方案，并在更接近人类疾病的前临床模型中验证其疗效，推动其向临床应用转化。