综述：新兴主动微流控器件赋能单细胞分析

这篇综述创新性地提出了一种靶向门静脉癌栓(PVTT)的纳米递送系统(LCCP)，通过共递送CXCL12 siRNA和索拉非尼(SOR)双重调控肿瘤微环境(TME)。该系统利用脂质纳米粒(LNPs)包裹siRNA和PLGA装载SOR，经CREKA肽修饰实现精准靶向，显著抑制癌症相关成纤维细胞(CAFs)活化并逆转SOR耐药，为晚期肝细胞癌(HCC)合并PVTT患者提供了突破性治疗策略。

　　

Abstract

门静脉癌栓(PVTT)是晚期肝细胞癌(HCC)的重要预后指标，其微环境中癌症相关成纤维细胞(CAFs)通过分泌C-X-C motif趋化因子配体12(CXCL12)促进肿瘤转移并诱导索拉非尼(SOR)耐药。研究团队开发了具有PVTT靶向能力的核壳结构纳米系统LCCP，通过脂质涂层包裹siCXCL12和PLGA装载SOR，显著下调CAFs中CXCL12表达。该策略在PVTT原位小鼠模型中成功重塑肿瘤微环境，抑制肿瘤细胞迁移侵袭并逆转SOR耐药性。

Introduction

原发性肝癌是全球癌症相关死亡的第三大病因，其中HCC占比达75-85%。合并PVTT的患者中位生存期仅2.7-4个月，现有疗法效果有限。单细胞测序揭示CAFs在PVTT微环境中异常活跃，通过自分泌CXCL12维持其促肿瘤表型。传统治疗方案SOR作为多靶点酪氨酸激酶抑制剂，虽能延长晚期HCC生存期，但面临CAFs介导的耐药难题。

临床和病理特征

通过分析GEO数据库中19,849个PVTT单细胞转录组数据，UMAP降维显示PVTT组织存在16个特征性细胞簇。免疫组化证实CAFs标志物α-SMA和Collagen Ⅰ在PVTT组织中高表达，且CXCL12水平与SOR耐药呈正相关。

讨论

LCCP纳米系统通过CREKA肽特异性结合纤维连接蛋白实现PVTT靶向递送。实验证实：1）siCXCL12有效阻断CAFs自激活环路；2）SOR抑制肿瘤细胞增殖信号通路；3）双重作用使PVTT体积缩小63.2%。RNA测序显示该方案显著调控Wnt/β-catenin和TGF-β等关键通路。

结论

该研究构建的LCCP纳米系统创新性地将TME调控与靶向治疗结合：1）脂质-PLGA杂化载体提高siRNA稳定性；2）CREKA修饰增强PVTT富集效率；3）CXCL12沉默与SOR协同抑制肿瘤转移。这为HCC合并PVTT提供了可转化的精准医疗方案。

材料与方法

使用CSQT-2细胞系建立PVTT模型，通过Transwell实验验证CAFs促进肿瘤侵袭的能力。纳米颗粒采用微流控技术制备，粒径控制在120±15nm，包封率达92.3%。体内实验采用Balb/c裸鼠原位移植模型，Micro-CT监测肿瘤进展。

创新点

1）首次揭示CXCL12在PVTT-CAFs中的核心调控作用；

2）开发可共载核酸与小分子的多功能递送平台；

3）临床前研究显示LCCP使小鼠生存期延长2.3倍。

该研究获国家重点研发计划(2023YFA0915400)等基金支持，相关技术已申请国际PCT专利。