利用MPXV/VACV抗原对比值在MSD免疫分析中区分自然感染与MVA-BN疫苗诱导的猴痘抗体反应

这篇研究通过对比传统中和试验（NT）和免疫荧光（IF）与新型MSD多重免疫分析，建立了基于猴痘病毒（MPXV）和痘苗病毒（VACV）同源抗原对（如A35R/A33R、B6R/B5R）的抗体比值模型，可精准区分自然感染、MVA-BN疫苗接种和未暴露人群（准确率88.9%），为资源匮乏地区的疫情监测和疫苗优先分配提供了创新工具。

　　

抗体反应的金标准检测与局限性

研究首先评估了传统方法——猴痘病毒（MPXV）和痘苗病毒（VACV）的中和试验（NT）以及MPXV免疫荧光（IF）的效能。结果显示，MPXV NT和IF对自然感染者的检测灵敏度达90%以上，但疫苗诱导的抗体与自然感染存在显著交叉反应：MPXV NT对疫苗接种者的特异性仅73.6%，而IF更低（43.4%）。这表明基于全病毒的检测难以区分免疫来源。

MSD多重免疫分析的突破与挑战

团队采用商业化的MSD Orthopoxvirus Panel 1试剂盒，定量分析了5对MPXV/VACV同源抗原（如A29L/A27L、E8L/D8L）的IgG反应。尽管所有抗原均能有效区分暴露与未暴露人群（特异性>90%），但单一抗原无法鉴别感染与疫苗接种（如MPXV B6R在两组中阳性率均>95%）。有趣的是，抗原间高度相关性（r>0.85）提示同源抗原对的比值可能蕴含分类信息。

同源抗原比值模型的建立

通过MA图和ROC曲线分析，研究发现A35R/A33R、B6R/B5R和E8L/D8L三对抗原的浓度比值在感染组显著高于疫苗组（P<0.0001）。例如，B6R/B5R比值在感染组中位数为1.8，而疫苗组仅0.9。基于1000次重复的交叉验证，这些比值展现出优异的分类性能：B6R/B5R的AUC达0.99，预测准确率93.2%，灵敏度91%，特异性93.3%。

组合模型的实践验证

将三对抗原比值整合为组合模型后，对未暴露人群的识别准确率提升至96.7%，但对单剂疫苗接种者的灵敏度降至73.8%（双剂可达100%）。模型在验证早年天花疫苗接种者时，75%被正确归类为疫苗阳性，印证了方法的稳健性。值得注意的是，E8L/D8L单独使用时对疫苗接种者的识别准确率高达98.1%，凸显其在疫苗监测中的特殊价值。

应用前景与局限性

该模型为资源有限地区提供了无需高防护实验室的血清学监测方案。然而，研究者指出，阈值需根据人群背景调整——例如非洲地区可能存在更高的本底信号。此外，中和抗体的短期衰减现象（如单剂疫苗后低血清转化率）提示需结合长期免疫动态研究，以进一步完善保护力相关标志物体系。

创新视角

相比既往研究聚焦单一MPXV特异性抗原（如A27L），本研究通过同源抗原对的“相对信号强度”开辟了新思路。这种策略不仅规避了抗原表位保守性的限制，还通过多重数据交叉验证提升了分类可靠性，为全球猴痘防控的精准决策提供了关键技术支撑。