综述：NK细胞来源外泌体在抗肿瘤策略中的应用

（编辑推荐）本综述系统阐述了NK细胞来源外泌体（NK-Exos）在肿瘤治疗中的多重机制与应用前景。这些纳米级囊泡携带穿孔素（PFN）、颗粒酶（Gzm）等细胞毒性分子，通过死亡受体配体（如FasL）介导凋亡，并能递送化疗药物（如顺铂）、siRNA（如BCL-2靶向序列）及诱导铁死亡（如RSL3）。工程化改造（如CAR修饰、IL-15 priming）可增强其靶向性和穿透血脑屏障（BBB）能力，为克服肿瘤微环境（TME）免疫抑制提供新策略。

　　

NK细胞来源外泌体的生物特性与分离技术

作为先天免疫淋巴细胞的重要亚群，自然杀伤细胞（NK）具有独特的抗肿瘤特性。其分泌的外泌体（NK-Exos）直径约50-150 nm，保留母细胞表面标志物如DNAM-1和NKG2D，并携带穿孔素、颗粒酶A/B（GzmA/B）等效应分子。通过差速超速离心或尺寸排阻色谱法分离的NK-Exos，经透射电镜（TEM）可观察到典型的杯状结构，而纳米颗粒追踪分析（NTA）能确认其粒径分布。

天然NK-Exos的直接抗肿瘤机制

这些纳米囊泡通过多途径杀伤肿瘤：

1. 细胞毒性分子释放：穿孔素在靶细胞膜形成孔道，使颗粒酶B（GzmB）进入胞质激活caspase-3/7，而颗粒酶A（GzmA）通过切割SET复合物诱发DNA损伤。

2. 死亡受体通路：表面FasL与肿瘤细胞Fas受体结合，募集FADD形成死亡诱导信号复合体（DISC），激活caspase-8/10级联反应。

3. 免疫调节：携带的miR-186可阻断TGF-β信号，而miR-30e-3p通过抑制CDK6阻滞食管癌（ESCC）细胞周期。

工程化改造提升治疗潜力

为提高靶向性，研究者开发了多种策略：

• 药物装载：超声法将奥沙利铂（L-OHP）封装后，对结直肠癌的细胞毒性显著增强；光敏剂氯e6（Ce6）与ROS敏感连接器TK结合，实现激光触发药物释放。

• 表面修饰：T7肽修饰增强血脑屏障穿透，而CAR结构使外泌体特异性识别HER2⁺肿瘤。

• 基因调控：载有siBCL-2的NK-Exos选择性诱导乳腺癌细胞凋亡，而miR-5193联合卡铂可抑制STAT3/PD-L1轴。

协同治疗与临床转化挑战

NK-Exos与PD-1抑制剂联用可逆转T细胞耗竭，而RSL3诱导的铁死亡与FASL细胞毒作用产生协同效应。但异质性分离效率（目前仅30-50%）、体内快速清除等问题仍需解决。最新研究通过锰配位纳米簇（AMNCs）下调FTO/GPX4轴，为口腔鳞癌（OSCC）提供了新型铁死亡治疗方案。

未来方向包括建立标准化生产流程、探索外泌体与TME动态互作，以及开发多功能杂交囊泡（如融合脂质体的hNRV）。这些进展将推动NK-Exos从实验室向临床转化，为实体瘤治疗提供突破性策略。