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低甲氧基果胶静电复合提升乳铁蛋白热稳定性的机制研究及其在功能食品中的应用价值
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月10日 来源:Journal of Dairy Science 4.4
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推荐:针对乳铁蛋白(LF)热敏感性导致的生物活性损失问题,研究人员通过构建LF与低甲氧基果胶(LMP)的静电复合物,系统评估了不同质量比(6:1至2:1)和pH条件(6/7)下的热稳定性。结果表明,2:1复合物在95°C处理10分钟后仍能维持二级结构完整性,通过圆二色谱(CD)和差示扫描量热法(DSC)证实其热变性温度提升至120.12°C,SDS-PAGE显示LF保留率显著提高。该研究为热加工功能性食品开发提供了新策略。
乳铁蛋白作为哺乳动物乳汁中重要的铁结合糖蛋白,具有抗菌、抗炎、抗氧化等多重生物活性,在食品和医药领域应用广泛。然而这个"多功能战士"有个致命弱点——极度怕热。当温度超过70°C时,其精密折叠的N-叶和C-叶结构就会像被拆开的俄罗斯套娃般逐渐解体,暴露出疏水核心并引发蛋白质聚集,导致生物活性大幅降低。这成为制约乳铁蛋白在巴氏杀菌乳品、婴幼儿配方奶粉等热加工食品中应用的瓶颈。
吉林大学食品科学与工程学院的研究团队在《Journal of Dairy Science》发表的最新研究中,创新性地采用低甲氧基果胶(LMP)作为"分子防护罩",通过静电相互作用构建了具有优异热稳定性的LF-LMP复合物。研究人员采用多尺度表征技术,系统解析了复合物在70°C和95°C热处理条件下的结构演变规律,为开发耐热型乳铁蛋白功能配料提供了理论依据和技术支撑。
研究团队首先通过酸碱滴定曲线筛选出pH 6和7条件下可溶性复合物的最佳形成比例,随后采用动态光散射、荧光光谱、傅里叶变换红外光谱(FTIR)等技术监测热处理引起的结构变化。差示扫描量热法(DSC)揭示复合物的热变性温度较天然LF提升约24°C,2:1复合物在pH 6时达到最高的120.12°C。圆二色谱分析显示热处理后α-螺旋含量仅下降5.3%,显著低于单独LF的13.8%降幅。SDS-PAGE电泳证实复合物中LF的分子量保持稳定,未出现明显降解条带。
在作用机制方面,研究发现LMP通过三重防护效应稳定LF结构:带负电的羧基与LF正电荷区域形成静电复合物,增强分子间斥力;多糖链的空间位阻阻碍LF分子相互靠近;同时掩蔽暴露的疏水基团,抑制热诱导的蛋白质聚集。特别值得注意的是,pH 6环境下因LF携带更高正电荷密度,其与LMP的相互作用强度比pH 7条件下提升约30%,这解释了为何该条件下复合物表现出更优的热稳定性。
该研究的创新价值在于首次阐明LMP对LF的热保护效应存在剂量依赖性,2:1质量比下复合物的热稳定性达到最优。研究团队还发现,虽然复合作用会暂时掩蔽LF部分抗氧化活性位点,但热处理后复合物的ABTS自由基清除能力仍能维持在60-70%水平,这为平衡热加工过程中的活性保留提供了重要参数。
这项成果不仅为乳铁蛋白在高温灭菌乳制品、功能性饮料等领域的应用开辟了新途径,其揭示的"电荷密度-空间位阻"协同稳定机制也可拓展至其他热敏感蛋白的保护策略开发。未来研究可进一步探索LF-LMP复合物在模拟胃肠消化环境中的稳定性,以及热加工对其免疫调节活性的影响,为精准设计功能食品提供更全面的科学依据。
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